Une transduction efficace des cellules souches hematopoïetiques est un préalable pour la thérapie... more Une transduction efficace des cellules souches hematopoïetiques est un préalable pour la thérapie génique des maladies génétiques comme la β‐thalassemie, l’Adrenoleucodystrophie et le Déficit Immunitaire Combiné Sévère. La petite molécule UM171 à été décrite comme étant une molécule capable de stimuler l’expansion in vitro des cellules souches hématopoïétiques humaines, permettant ainsi une plus large application des thérapies basées sur les cellules souches. Nous avons aussi conduit des études supplémetaires pour confirmer la capacité de UM171 à expandre les souches hématopoïétiques. Durant ce travail, nous avons découvert que UM171 pouvait aussi augmenter de maniére significative, l’efficience de la transduction lentivirale des cellules hématopoïetiques primitives dérivées de sang de cordon. En plus, nous avons montré que UM171 augmentait la transduction des cellules hématopoïeques ayant les phénotypes les plus immatures. Des études plus approfondies ont aussi révélé que UM171 pou...
Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie... more Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie genique des maladies genetiques comme la β‐thalassemie, l’Adrenoleucodystrophie et le Deficit Immunitaire Combine Severe. La petite molecule UM171 a ete decrite comme etant une molecule capable de stimuler l’expansion in vitro des cellules souches hematopoietiques humaines, permettant ainsi une plus large application des therapies basees sur les cellules souches. Nous avons aussi conduit des etudes supplemetaires pour confirmer la capacite de UM171 a expandre les souches hematopoietiques. Durant ce travail, nous avons decouvert que UM171 pouvait aussi augmenter de maniere significative, l’efficience de la transduction lentivirale des cellules hematopoietiques primitives derivees de sang de cordon. En plus, nous avons montre que UM171 augmentait la transduction des cellules hematopoieques ayant les phenotypes les plus immatures. Des etudes plus approfondies ont aussi revele que UM171 pou...
Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, Mar 1, 2017
Retroviral integration site analysis and barcoding have been instrumental for multiplex clonal fa... more Retroviral integration site analysis and barcoding have been instrumental for multiplex clonal fate mapping, although their use imposes an inherent delay between sample acquisition and data analysis. Monitoring of multiple cell populations in real time would be advantageous, but multiplex assays compatible with flow cytometric tracking of competitive growth behavior are currently limited. We here describe the development and initial validation of three generations of lentiviral fluorescent genetic barcoding (FGB) systems that allow the creation of 26, 14, or 6 unique labels. Color-coded populations could be tracked in multiplex in vitro assays for up to 28 days by flow cytometry using all three vector systems. Those involving lower levels of multiplexing eased color-code generation and the reliability of vector expression and enabled functional in vitro and in vivo studies. In proof-of-principle experiments, FGB vectors facilitated in vitro multiplex screening of microRNA (miRNA)-in...
Herein we demonstrate that oncolytic herpes simplex virus -1 (HSV-1) potently activates human per... more Herein we demonstrate that oncolytic herpes simplex virus -1 (HSV-1) potently activates human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) to lyse leukemic cell lines and primary acute myeloid leukemia samples, but not healthy allogeneic lymphocytes. Intriguingly, we found that ultraviolet light (UV)-inactivated HSV-1 (UV-HSV-1) is equally effective in promoting PBMC cytolysis of leukemic cells, and is 1,000 to 10,000-fold more potent at stimulating innate anti-leukemic responses than UV-inactivated cytomegalovirus, vesicular stomatitis virus, reovirus or adenovirus. Mechanistically, UV-HSV-1 stimulates PBMC cytolysis of leukemic cells, partly via TLR-2/PKC/NFκB signaling, and potently stimulates expression of CD69, degranulation, migration, and cytokine production in NK cells, suggesting that surface components of UV-HSV-1 directly activate NK cells. Importantly, UV-HSV-1 synergizes with IL-15 and IL-2 in inducing activation and cytolytic activity of NK cells. Additionally, UV-HSV-1 s...
The small number of hematopoietic stem and progenitor cells in cord blood units limits their wide... more The small number of hematopoietic stem and progenitor cells in cord blood units limits their widespread use in human transplant protocols. We identified a family of chemically related small molecules that stimulates the expansion ex vivo of human cord blood cells capable of reconstituting human hematopoiesis for at least 6 months in immunocompromised mice. The potent activity of these newly identified compounds, UM171 being the prototype, is independent of suppression of the aryl hydrocarbon receptor, which targets cells with more-limited regenerative potential. The properties of UM171 make it a potential candidate for hematopoietic stem cell transplantation and gene therapy.
Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie... more Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie genique des maladies genetiques comme la β‐thalassemie, l’Adrenoleucodystrophie et le Deficit Immunitaire Combine Severe. La petite molecule UM171 a ete decrite comme etant une molecule capable de stimuler l’expansion in vitro des cellules souches hematopoietiques humaines, permettant ainsi une plus large application des therapies basees sur les cellules souches. Nous avons aussi conduit des etudes supplemetaires pour confirmer la capacite de UM171 a expandre les souches hematopoietiques. Durant ce travail, nous avons decouvert que UM171 pouvait aussi augmenter de maniere significative, l’efficience de la transduction lentivirale des cellules hematopoietiques primitives derivees de sang de cordon. En plus, nous avons montre que UM171 augmentait la transduction des cellules hematopoieques ayant les phenotypes les plus immatures. Des etudes plus approfondies ont aussi revele que UM171 pouvait aussi augmenter la transduction des cellules souches hematopoietiques avec des lentivirus ayant different pseudotypes. Au total ces decouvertes ont pour consequence, une nette amelioration des protocoles d’expansion et de transduction des cellules souches hematopoietiques a travers un meilleur rendement en cellules souches et des taux eleves de transfert de gene en utilisant des quantites reduites de particules virales
Une transduction efficace des cellules souches hematopoïetiques est un préalable pour la thérapie... more Une transduction efficace des cellules souches hematopoïetiques est un préalable pour la thérapie génique des maladies génétiques comme la β‐thalassemie, l’Adrenoleucodystrophie et le Déficit Immunitaire Combiné Sévère. La petite molécule UM171 à été décrite comme étant une molécule capable de stimuler l’expansion in vitro des cellules souches hématopoïétiques humaines, permettant ainsi une plus large application des thérapies basées sur les cellules souches. Nous avons aussi conduit des études supplémetaires pour confirmer la capacité de UM171 à expandre les souches hématopoïétiques. Durant ce travail, nous avons découvert que UM171 pouvait aussi augmenter de maniére significative, l’efficience de la transduction lentivirale des cellules hématopoïetiques primitives dérivées de sang de cordon. En plus, nous avons montré que UM171 augmentait la transduction des cellules hématopoïeques ayant les phénotypes les plus immatures. Des études plus approfondies ont aussi révélé que UM171 pou...
Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie... more Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie genique des maladies genetiques comme la β‐thalassemie, l’Adrenoleucodystrophie et le Deficit Immunitaire Combine Severe. La petite molecule UM171 a ete decrite comme etant une molecule capable de stimuler l’expansion in vitro des cellules souches hematopoietiques humaines, permettant ainsi une plus large application des therapies basees sur les cellules souches. Nous avons aussi conduit des etudes supplemetaires pour confirmer la capacite de UM171 a expandre les souches hematopoietiques. Durant ce travail, nous avons decouvert que UM171 pouvait aussi augmenter de maniere significative, l’efficience de la transduction lentivirale des cellules hematopoietiques primitives derivees de sang de cordon. En plus, nous avons montre que UM171 augmentait la transduction des cellules hematopoieques ayant les phenotypes les plus immatures. Des etudes plus approfondies ont aussi revele que UM171 pou...
Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, Mar 1, 2017
Retroviral integration site analysis and barcoding have been instrumental for multiplex clonal fa... more Retroviral integration site analysis and barcoding have been instrumental for multiplex clonal fate mapping, although their use imposes an inherent delay between sample acquisition and data analysis. Monitoring of multiple cell populations in real time would be advantageous, but multiplex assays compatible with flow cytometric tracking of competitive growth behavior are currently limited. We here describe the development and initial validation of three generations of lentiviral fluorescent genetic barcoding (FGB) systems that allow the creation of 26, 14, or 6 unique labels. Color-coded populations could be tracked in multiplex in vitro assays for up to 28 days by flow cytometry using all three vector systems. Those involving lower levels of multiplexing eased color-code generation and the reliability of vector expression and enabled functional in vitro and in vivo studies. In proof-of-principle experiments, FGB vectors facilitated in vitro multiplex screening of microRNA (miRNA)-in...
Herein we demonstrate that oncolytic herpes simplex virus -1 (HSV-1) potently activates human per... more Herein we demonstrate that oncolytic herpes simplex virus -1 (HSV-1) potently activates human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) to lyse leukemic cell lines and primary acute myeloid leukemia samples, but not healthy allogeneic lymphocytes. Intriguingly, we found that ultraviolet light (UV)-inactivated HSV-1 (UV-HSV-1) is equally effective in promoting PBMC cytolysis of leukemic cells, and is 1,000 to 10,000-fold more potent at stimulating innate anti-leukemic responses than UV-inactivated cytomegalovirus, vesicular stomatitis virus, reovirus or adenovirus. Mechanistically, UV-HSV-1 stimulates PBMC cytolysis of leukemic cells, partly via TLR-2/PKC/NFκB signaling, and potently stimulates expression of CD69, degranulation, migration, and cytokine production in NK cells, suggesting that surface components of UV-HSV-1 directly activate NK cells. Importantly, UV-HSV-1 synergizes with IL-15 and IL-2 in inducing activation and cytolytic activity of NK cells. Additionally, UV-HSV-1 s...
The small number of hematopoietic stem and progenitor cells in cord blood units limits their wide... more The small number of hematopoietic stem and progenitor cells in cord blood units limits their widespread use in human transplant protocols. We identified a family of chemically related small molecules that stimulates the expansion ex vivo of human cord blood cells capable of reconstituting human hematopoiesis for at least 6 months in immunocompromised mice. The potent activity of these newly identified compounds, UM171 being the prototype, is independent of suppression of the aryl hydrocarbon receptor, which targets cells with more-limited regenerative potential. The properties of UM171 make it a potential candidate for hematopoietic stem cell transplantation and gene therapy.
Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie... more Une transduction efficace des cellules souches hematopoietiques est un prealable pour la therapie genique des maladies genetiques comme la β‐thalassemie, l’Adrenoleucodystrophie et le Deficit Immunitaire Combine Severe. La petite molecule UM171 a ete decrite comme etant une molecule capable de stimuler l’expansion in vitro des cellules souches hematopoietiques humaines, permettant ainsi une plus large application des therapies basees sur les cellules souches. Nous avons aussi conduit des etudes supplemetaires pour confirmer la capacite de UM171 a expandre les souches hematopoietiques. Durant ce travail, nous avons decouvert que UM171 pouvait aussi augmenter de maniere significative, l’efficience de la transduction lentivirale des cellules hematopoietiques primitives derivees de sang de cordon. En plus, nous avons montre que UM171 augmentait la transduction des cellules hematopoieques ayant les phenotypes les plus immatures. Des etudes plus approfondies ont aussi revele que UM171 pouvait aussi augmenter la transduction des cellules souches hematopoietiques avec des lentivirus ayant different pseudotypes. Au total ces decouvertes ont pour consequence, une nette amelioration des protocoles d’expansion et de transduction des cellules souches hematopoietiques a travers un meilleur rendement en cellules souches et des taux eleves de transfert de gene en utilisant des quantites reduites de particules virales
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