Introduccin a la espectrometra de
absorcin molecular
ultravioleta/visible
Espectroscopia de absorcion UV / Visible
Es espectroscopia de absorcion de
la radiacin en la regin de 160 nm
a 780 nm.
Se basa en la medida de
transmitancia (T) o absorbancia
(A) de disoluciones colocadas en
cubetas transparentes con un
camino ptico de b centmetros.
La concentracin c de un analito
absorbente
est
relacionado
linealmente con la absorbancia:
Cuando un haz de radiacion
incide sobre la cubeta
ocurren reflexiones en las
interfases ( un 8.5 % del haz
se pierde por reflexion).
Tambien, ocurre dispersion y
absorcion de la radiacion.
Para compensar estos
efectos, la potencia del haz
transmitido por la disolucion
analizada se compara con la
potencia del haz transmitido
por una cubeta igual que
contiene solo disolvente.
As se obtienen la
transmitancia y absorbancia
experimentales
Ley de Beer
Limitaciones:
Es una ley limite (describe correctamente la absorcion de
disoluciones de baja concentracion, < 0.01 M)
A concentraciones > 0.01 M, la relacion entre absorbancia y
concentracion ya no es lineal.
depende del indice de refraccion del medio, en ocasiones esto
genera desviaciones de la ley de Beer
Desviaciones Instrumentales
debidas a Radiacion
Policromatica
La ley de Beer se cumple
solo cuando la radiacion es
monocromatica.
En practica es imposible
obtener radiacion
monocromatica, lo comun es
tener un banda de longitudes
de onda simetrica en torno a
la deseada.
Idealizacion
Efecto de la ranura del monocromador
en las medidas de absorbancia
La ranura que enfoca el haz de radiacion
en el monocromador (selector de ) afecta
la resolucion del espectro obtenido:
Ranuras angostas producen espectros
bien resueltos.
Ranuras anchas producen perdida de
resolucion del espectro
Anchuras grandes de ranura producen
picos mas anchos y bajos.
Precaucion: ranuras demasiado angostas
producen una reduccion de la energia
radiante y producen perdidas de detalles
por el aumento de la relacion seal/ruido.
Efecto de la anchura de la ranura en la altura de los picos. La muestra es una
disolucion de cloruro de praseodimio
Anchura = 1 nm
Anchura = 0.5 nm
Anchura = 0.1 nm
INSTRUMENTACION
Existen mas de 100 modelos de instrumentos UV/Visible. El costo
de un espectrofotometro UV/Visible varia de unos cientos de
dolares a 30000 dolares.
Componentes
1) Fuente
2) Selector de longitud de onda
3) Recipiente para la muestra
4) Detectores de radiacion
5) Procesadores de seal y dispositivos de lectura
FUENTES
Requisito: fuente continua cuya potencia sea estable
en un intervalo grande de
1. Lmparas de Deuterio e Hidrgeno:
Excitacion electrica del H2 o D2 produce un espectro
continuo en la regin UV.
Actualmente se prefiere la de D2 (proporciona una
esfera de radiacin mas grande e intensa que la de
H2)
Ambas producen un espectro continuo til de 160
375 nm.
Seal de salida de la lmpara de Deuterio
Importante: Las lmparas de Deuterio e Hidrgeno requiere celdas de
cuarzo porque el vidrio absorbe fuertemente a < 350 nm
2. Lmpara de filamento de Wolframio
(envoltura de vidrio)
Sirve para la regin visible
La temperatura del filamento de wolframio
es 2870 K
Emite radiacin entre 350 y 2500 nm
Para que la seal sea estable la fuente
requiere transformadores de potencial
constante o reguladores de potencial.
Alternativa: lmpara de
wolframio/halgeno. Mas duracin ,
requieren una envoltura de cuarzo porque
funciona a mayor temperatura (3500 K)
3. Lmpara de arco de xenn
Se pasa corriente a traves de gas xenn,
produce radiacion intensa entre 200 y
1000 nm.
Recipientes para la Muestra
Celdas o cubetas de material que
permita el paso de la radiacion.
Depende de la region donde se desea
trabajar:
< 350 nm cuarzo o silice fundida
350 2000 nm
vidrio
silicatado
Ancho mas comn: 1 cm
Importante: el mantenimiento de la
cubeta es crucial en los resultados. Es
indispensable limpiarlas
escrupulosamente antes y despues de
usarla.
TIPOS DE INSTRUMENTOS
1. De haz simple
2. De doble haz espacial
3. De doble haz temporal
4. Multicanal
HAZ SIMPLE
HAZ DOBLE
SEPARADO
ESPACIALMENTE
HAZ DOBLE
SEPARADO
TEMPORALMENTE
ESQUEMA DE HAZ SIMPLE
ESQUEMA DE DOBLE HAZ ESPACIAL
ALGUNOS INSTRUMENTOS CARACTERISTICOS
1. Fotmetros
Sencillos y baratos
Faciles de mantener
Alto rendimiento energtico
Produce analisis cuantitativos de
similar calidad que los obtenidos con
equipos mas sofisticados
Poseen varios filtros para transmitir en
diferentes zonas del espectro visible.
En general, el filtro mas apropiado es
aquel con color complementario al
de la disolucin analizada.
Espectrofotmetros
Gran variedad de estos instrumentos.
Algunos sirven solo para la region visible,
otros para la region UV/Visible y otros
incluso llegan al infrarrojo cercano.
1. Espectrofotmetros para region visible
Trabajan en la region de 380 a 800 nm
De un solo haz, baratos y sencillos
Costo 1000 3000 USD
Resistentes y transportables
El mas popular es el Spectronic 20:
Fuente de wolframio, cubeta y detector,
lector de escala metrica (14 cm de largo)
graduado en absorbancia y transmitancia
Espectrofotometros de haz simple para UV/Visible
Trabajan entre 200 y 1000 nm
Fuente: lamparas de wolframio y
deuterio intercambiables
Detector: fotomultiplicador
Elemento dispersante: rejilla de
difraccion
Lector digital
Precio: 2000 8000 USD
Anchuras de banda del haz: 2- 8 nm
Espectrofotometros de doble haz para UV/Visible
Gran variedad de modelos.
Ms caros: 4000 15000 USD (sin
registrador)
Trabajan entre 195 850 nm
Especialmente apropiados para
anlisis cuantitativo
Introduccin a la Espectrometra
Infrarroja
La regin IR del espectro: 12800 a 10 cm-1
0.78 a 1000 m
Se divide en IR cercano, IR medio e IR lejano
La regin del IR medio es tradicionalmente las ms utilizada:
IR medio: 2.5 a 50 m o 4000 a 200 cm-1
Fotones con en el rango IR medio tienen energas bajas: 1 15
kcal/mol
No provocan transiciones electrnicas, pero inducen vibraciones
de los enlaces covalentes.
Enlaces covalentes = resortes flexibles que pueden ser estirados
o doblados.
Las molculas orgnicas absorben radiacin IR y sufren una
amplia variedad de movimientos vibratorios
Los espectrmetros IR registran el espectro de absorcin de un
compuesto, distintivo de su estructura molecular.
Ejemplo:
Espectro IR
de la
Vainillina
La escala usada en abcisas es dada en centmetros recprocos (cm-1),
una magnitud asociada directamente a la frecuencia
Los espectros IR pueden obtenerse de muestras en cualquier fase
(lquidos, slidos y gaseosos).
Los lquidos se registran como una pelcula fina atrapada entre 2
ventanas de NaCl (el vidrio absorbe radiacin IR)
Se deben usar solventes que no disuelvan las ventanas (CHCl3 y CCl4)
Los slidos pueden
(a) incorporar en una fina pastilla de KBr preparada a presin o
(b) mezclarse con un lquido no voltil y molerlo hasta formar una pasta
Ventana de
NaCl
Ensamble de la
celda IR
Una molcula compuesta de n tomos tiene 3n grados de libertad:
6 son traslaciones y rotaciones
Entonces hay 3n 6 grados de libertad vibratorios
Los modos vibratorios son estiramiento, deformacin, movimiento
de tijera, balanceo y torsion
Ejemplo: La molcula de formaldehdo H2C=O tiene 6 modos
vibratorios que se traducen en 6 absorciones en su espectro IR
