Tema 19

Ingeniería genética

Biología 2º Bachillerato
Departamento de CC.NN
IES JOAQUÍN TURINA
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BioPAU es una app para Android para preparar el

examen de selectividad o PAU de biología (2º de
bachillerato). Contiene casi todas las preguntas y
respuestas de las pruebas de Andalucía (España)
desde el 2005 clasificadas por temas y ordenadas
No está actuliazado a la LOCME

2
Tema 19. Ingeniería genética

• Biotecnología
• Ingeniería genética. Técnicas
• ADN recombinante y los enzimas de restricción
• Crispr/cas9
• Los colores de la biotecnología
• Los alimentos transgénicos
• Biomedicina
• Genómica

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 Biotecnología

Utilización de organismos vivos, o de sus

componentes, con fines industriales

Seres vivos: componentes o funciones

Multidisciplinar

Objetivo:
Un producto, ej. yogurt
Un servicio, ej. depurar agua

4
¿Es la biotecnología una disciplina actual?

Primeros pasos: industria alimenticia

Minería: extracción de Cu (S. XVII, Río Tinto)

S. XIX: Pasteur estudios sobre la fermentación

5
 Biotecnología actual
Cultivos celulares Anticuerpo monoclonal

Ingeniería genética

6
 Un proyecto biotecnológico

Árbol-farola, un ejemplo de 2x1 biotecnológico

7
 Ingeniería genética

Manipulación de la
información genética
 Aislamiento
 Modificando
• Eliminando
• Añadiendo
genes según la finalidad
deseada.

8
 Historia de la Genética

1865 1910 1953 1970 2007

Genética mendeliana

Genética de Morgan

Genética molecular

https://unlockinglifescode.
org/timeline?tid=4 Ingeniería genética

9
Ingeniería genética

10
 Ventajas de la Ingeniería genética

 Rapidez
(frente a hibridación clásica)

 Sencillez
(incorpora sólo el gen deseado)

 Evolución horizontal
(permite combinar genes entre distintas especies)

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Técnicas de ingeniería genética

• Crear ADN recombinante

• Clonar ADN

• La técnica de la PCR

• Secuenciación del ADN

• Tecnología CRISPR/Cas9

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Técnicas: 1. ADN recombinante
ADN recombinante
Son moléculas de ADN artificial
formadas al unir fragmentos de ADN sintético o natural
de distintos seres vivos

ADN recombinante
es viable
se duplicará más tarde
en células vivas

Un ser vivo con el ADN modificado se llama transgénico

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Técnicas: 1. ADN recombinante

Palíndromos

1. Dábale arroz a la zorra el abad

2. Etna da luz azul a Dante
3. Salta Lenin el Atlas
4. Olga nos mima
5. Anás usó tu auto Susana

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Técnicas: 1. ADN recombinante
Fragmentar el ADN
Enzimas: endonucleasas de restricción. Rompe
ADN en lugares específicos
Ej. Eco RI
 Reconocen palíndromos
 Extremos cohesivos

15
Técnicas: 1. ADN recombinante

Crear ADN recombinante

Se basa en la complementariedad de las bases

de ADN
1. enzima de restricción 16
17
 ¿Qué me pueden preguntar?

Averigua los productos que resultan cuando el siguiente fragmento de ADN

se digiere: a) con Eco Rl; b) Hae III; c) con las dos enzimas a la vez:

5´-TAAATTGCGCAATTCGAGCTTAAGGGCCGCGCCGAAGCTTTAAA-3'
3' -AATTAACGCCTTAAGCTCGAATTCCCGGCGCGGCTTCGAAATTT-5‘

HaeIII: 5´GG/CC 3´ EcoRI: 5´G/AATTC 3´

3´CC/GG 5´ 3´CTTAA/G 3´

18
Técnicas: 2. Clonación de ADN

Clonar ADN

1. Escoger el vector de clonación

2. Seleccionar el ADN a clonar

3. Crear ADN recombinante

4. Introducirlo en la bacteria o célula eucariota

(célula huésped que lo clona o multiplica)

Se crea ADN clonado para tener más posibilidad de éxito

19
 Técnicas: 2. Clonación de ADN
1. Escoger vector de
clonación Metodología
2. Seleccionar ADN
recombinante

3. Crear ADN
recombinante

4. Introducción en el
huésped transgénico

20
 Técnicas: 2. Clonación de ADN

Vector de clonación

Plásmido
Bacteriófago
Retrovirus

Introducen el gen
en la célula huésped deseada

21
 Técnicas: 2. Clonación de ADN

Huésped transgénico
Condiciones:

 Capacidad de crecimiento rápida

 Medio de cultivo barato

 No ser dañino ni patógeno

 Aceptar el ADN recombinante

 Contener enzimas para replicar el vector

El huésped transgénico expresa el ADN

recombinante
22
 Técnicas: 2. Clonación de ADN
ADN recombinante

¡ojo!
marcador

ADN recombinante = vector + gen de interés + (marcador)

Se necesitan dos enzimas: EcoR –rompe- y ligasa –une- 23
Técnicas: 2. Clonación de ADN

Huésped transgénico
Se usan :
Procariotas :
Escherichia coli,
Bacillus subtilis

Eucariotas :
Saccharomyces
cerevisae

24
Técnicas: 2. Clonación de ADN

Selección de clones con ADN híbrido

• No todas las células huésped expresan el gen

• Se usa un marcador para reconocerlas (resistencia a
antibiótico, luminosidad…)

25
Técnicas: 3. La PCR K. Mullis
Nobel 1993

Amplificación del ADN

• Se llama PCR (Reacción en cadena de la polimerasa)

• Técnica para obtener (rápidamente) miles de copias de un

fragmento de ADN

• Utiliza ADN-polimerasa de una bacteria Thermus aquaticus

(Taq) que soporta altas Tº

• Requiere conocer algo de su secuencia: cebador

26
Técnicas: 3. La PCR

La técnica de la PCR

94º C 50º C 72º C

27
 Técnicas: 3. La PCR

Técnica de la PCR
Utiliza: muestra base, cebador,
NTP, ADN-polimerasa de T.
aquaticus (Taq)

94º C 50º C 72º C

28
Técnicas: 4. Secuenciar ADN

Secuenciación del ADN

• Se rompe en fragmentos con EcoR y ultrasonidos

• Se clonan los fragmentos
• Se secuencian

Genómica
 Catálogo de los genes de una especie
 Determinación de su organización, estructura y función

 Conocer interacciones entre genes

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Técnicas: 4. Secuenciar ADN

Secuenciación de ADN

30
Técnicas: 5. CRISPR/Cas

¿Qué es el sistema CRISPR/Cas9?

Ni CRISPR es el nombre de una nueva marca de aperitivo
crujiente ni Cas es el nombre de un refresco para
acompañarlo

Clustered Regularly
Interspaced Short
Palindromic
Repeats

E. Charpentier (francesa) 31
y J. Doudna (USA)
 Tecnología CRISPR/Cas9

• Herramienta ideal
• Simplicidad de uso
• Coste moderado
• Accesible en cualquier
laboratorio genético

https://www.youtube.com/watch?v
=TdBAHexVYzc
https://www.youtube.com/
https://www.youtube.com/watch?v watch?v=k99bMtg4zRk
=O3e2_Ctty_M
32
Técnicas: 5. CRISPR/Cas
Técnicas: 5. CRISPR/Cas
Premio Breakthrough 2015
y El Princesa de Asturias 2015
Protección y
reparación
del ADN
(2012)
• Sistema
CRISPR/Cas9 en
E.coli
• Sistema de
genes repetidos
que promueven
resistencia
contra fagos

33
Técnicas: 5. CRISPR/Cas
Múltiples aplicaciones

• Implicaciones éticas y
sociales
34
35
 ¿Qué me pueden preguntar?

• a) ¿En qué consiste la reacción en cadena de la

polimerasa?

• b) ¿Qué funciones desempeñan las enzimas de

restricción?

• c) Define DNA recombinante.

• d) ¿Qué peligro, respecto al equilibrio ecológico y

respecto a la salud humana, se puede derivar de la
utilización de técnicas de ingeniería genética?
36
 Aplicaciones de ingeniería genética
Ana Molina 37
Biotecnología verde: agroalimentación

Plantas transgénicas más resistentes

 a plagas de insectos

 a heladas, escasez nutrientes, salinidad

Mejora vegetal y animal:

 más nutritivas

 tamaños mayores

Biofactorías: sustancias de interés:

 vacunas contra paludismo 38

 Biotecnología gris: medioambiental

• Depuración de aguas
residuales (EDAR):

• Compost

• Biorremediación
 biodegradación de petróleo

 vertidos tóxicos

 metales pesados, fenoles,...

39
 Biotecnología roja: biomedicina

diseño de organismos para producir antibióticos,

el desarrollo de vacunas más seguras y nuevos

fármacos,

los diagnósticos moleculares,

las terapias regenerativas (células madre, tejidos,

órganos)

curar enfermedades a través de la manipulación génica.

40
Insulina: primera hormona producida por IG

41
 Otros ejemplos en medicina

• Producción de fármacos y vacunas

 Además de insulina, hormona de crecimiento, interferón, factor
VIII de la coagulación, antibióticos
• Diagnóstico clínico
 Fibrosis quística, hemofilia, artritis reumatoide, ciertos tipos de
cáncer, etc.
• Terapia genética
 Talasemia, carencia del enzima Adenosin Desaminasa (ADA)
• Trasplante de órganos
 Células madre de embriones o adultas

42
Medicina personalizada

Mapas de mutaciones cancerígenas 43

Biochip de ADN

44
 Terapia génica

• In vivo: genes se introduce dentro de un vector y son

reconocidos por células diana específicas

• Ex vivo: se extraen células, se cultivan, se modifican , se

reintroducen

45
 Otros aplicaciones biomédicas

• Investigación policial y medicina forense

 Identificación de supuestos implicados

• Pruebas de paternidad
 Por comparación de muestras de ADN

• Estudios históricos y arqueológicos

 Investigación sobre restos humanos

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 ¿Qué me pueden preguntar?

En ingeniería genética se usan técnicas de ADN recombinante para

modificar bacterias con dos propósitos principales: obtener muchas
copias de un determinado gen y obtener proteínas que son útiles para
alguna aplicación.

En este caso queremos encontrar un tratamiento para ayudar a niños con

problemas de crecimiento.

a) Representa en un esquema como construirías un plásmido bacteriano

que contenga el gen humano de la hormona de crecimiento.

b) ¿Cómo diseñarías el tratamiento? ¿Suministrando el gen clonado o la

proteína producida? Razona tu respuesta.
47
Biotecnología blanca: en la industria

Incluye:
 las aplicaciones de la industria química,
 procesamiento de materias primas,
 generación de tejidos biológicos,
 generación de combustibles (biocombustibles),

48
 Biotecnología blanca

Su principal objetivo es

• la creación de productos fácilmente degradables,

• que consuman menos energía y menos recursos

• generen menos desechos durante su producción.

49
 Biotecnología azul: marina

El 80 % de los seres vivos se encuentran en los océanos

Aplicaciones
• acuicultura,
• nuevos productos y
materiales
• cosmética y
• nuevos medicamentos

50
Otros colores de
biotecnología

• Symbiotica (asoc)
http://symbiotica.febiot
ecdivulga.es/

51
 Genómica

• Genómica funcional: caracterizar la función de los genes

 análisis de los perfiles de expresión génica,

 análisis fenotípicos de mutantes

 análisis de interacciones proteicas

52
Organismos modelo

• Escherichia coli

• Saccharomyces cerevisae

• Drosophila melanogaster

• Caenorhabditis elegans

• Mus musculus

• Arabidopsis thaliana
53
 Proyecto Genoma Humano

• Desarrollado entre 1990–2003 por:

 Universidades públicas
 Empresas privadas (Celera
Genomics)

• Fue declarado por la ONU en 1997

Patrimonio de la Humanidad

(pero no las pruebas diagnóstico, etc..)

Cromosoma nº3 54
 ¿Qué nos enseñó el Proyecto Genoma?
• Genoma humano consta de 25-30.000 genes ( 3.200 millones de pares
de bases ), frente a los 100.000 calculados
 el número de genes es relativamente bajo
• El 99,9% son iguales en todas las personas, y en un 98% idéntico al de
chimpancés
 Las diferencias con otras especies son menos de lo esperado
• El 90% del genoma no tiene función conocida
 Solo una pequeña parte codifica proteínas o ARN
• Cada gen puede codificar unas 5 proteínas diferentes
 Gracias al procesamiento alternativo del ARNm (exones-intrones)
55
 Genoma Humano

• Los humanos difieren entre si: en 1 /1000 nucleótidos.

• Dados aprox. 3.200 millones de nucleótidos: hay 3,2

millones de posibles diferencias

Son los SNPs (Polimorfismos de un solo nucleótido)

Sirven para descubrir la base genética de muchas enfermedades

Para estudiar la respuesta a determinados fármacos

56
 Coste por genoma

El coste de secuenciación ha disminuido de 100,000$

por 106 letras (2001) a 10 cent$ actualmente.
57
 HGP y otros proyectos
• Herramienta base para investigación biomédica y genética clínica
 Disponer de sondas y marcadores para diagnóstico de enfermedades

• Tanto enfermedades genéticas, como cáncer e infecciones

• Diseñar fármacos específicos: tratar las causas y no solo los síntomas

• Diagnóstico pretransplante

• Conocimientos sobre la evolución del hombre

• Migraciones de poblaciones humanas a lo largo de la historia

El próximo reto es conocer todas las

proteínas que se codifican Se podrán aislar y patentar
“genes terapéuticos”
58
https://www.youtube.com/watch?
v=TwXXgEz9o4w
Encode
• Encyclopedia of DNA Elements

• Proyecto (USA) para identificar todos los elementos

funcionales del genoma humano (2003-2012)

• Criticas:
 Alto costo ~$400 millones en total

 Resultados escasos
https://www.youtube.com/watch?v=UmGVpxbCWm8

59
 Resultados de Encode

• Mas del 80 % del ADN tiene alguna actividad

• Los procesos de regulación son más complejos de lo previsto

• ADN no codificante interviene en procesos de regulación a varios niveles

• Las secuencias no codificadoras se mantienen en el curso de la evolución

60
 Proteómica
• Estudia a gran escala las proteínas celulares

• Se centra en su estructura y función.

• Avances en:
 Modificaciones post-traduccionales

 Interacciones entre proteínas

• Aplicación en biomedicina:
 desarrollo de fármacos (anticancerígenos, cardiovascular, etc.)

 métodos de diagnóstico

 desarrollo de vacunas
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 Uso de armas biológicas

Riesgos de la terapia génica

La huella genética” y
la discriminación

Biotecnología negra
Ana Molina 62
 Biohacking, ¡cualquiera puede hacerlo!

• Ejp. Genspace in Brooklyn, New York, desde 2010

• En Silicon Valley (Sunnyvale) California, un grupo de

aficionados: Biocurious empezó en 2011.

• En Cambridge, Massachusetts, se encuentra Boston

Open Source Science Lab (BOSLab)

• En Baltimore, otro llamado BUGSS

63