Prueba Rápida en Casete OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM (Suero / Plasma / Sangre Total) Página 1 de 2

Prueba Rápida OnSite® Duo Dengue Ag-

4. Atempere los reactivos de 15 a 30°C antes de usarlos.

IgG/IgM 5. No utilice los componentes de otro tipo de prueba como sustituto de los componentes
de este kit.
6. No utilice sangre hemolizada para la prueba.
7. Use ropa protectora y guantes desechables mientras manipule los reactivos del kit y las
R0062C muestras clínicas. Lave sus manos después de realizar la prueba.
8. Siga las precauciones universales del CDC de Estados Unidos para la prevención de
transmisión del VIH, VHB y otros patógenos de transmisión sanguínea.
9. No fume, beba ni coma en las áreas donde se manipulen muestras o reactivos del kit.
Instrucciones de Uso 10. Deseche todas las muestras y los materiales del kit usados como residuos biológicos peligrosos.
USO 11. Manipule los controles positivos y negativos de la misma forma como a las muestras de
los pacientes.
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM es un inmunoensayo de flujo lateral para la detección 12. Los resultados de las pruebas deben ser leídos entre 20-25 minutos después de agregar la
y diferenciación simultánea de IgG e IgM anti-virus dengue así como del antígeno del dengue NS1 (DEN muestra al pozo de muestra. Los resultados leídos fuera de los 20-25 minutos deben
1,2,3,4) en suero, plasma o sangre total humanos. Está destinado a ser utilizado por profesionales de la considerarse inválidos y deben ser repetidos.
salud como una ayuda en el diagnóstico de infección con el virus del dengue. 13. No procese la muestra en un lugar con fuerte corriente de aire, como ventiladores o aire
Cualquier uso o interpretación del resultado de esta prueba preliminar debe tomar en cuenta otros acondicionado.
resultados clínicos y el criterio profesional de los proveedores de atención de la salud. Debe considerarse PREPARACION DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
el uso de métodos de ensayo alternativos para confirmar el resultado obtenido por este dispositivo.
Todos los reactivos vienen listos para ser usados. Almacene los dispositivos nuevos y sellados entre 2-
RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA 30°C. Si se almacena de 2-8°C, asegúrese de que el dispositivo de prueba se lleva a temperatura
El virus del dengue, un virus envuelto ARN monocatenario positivo, que comprende cuatro serotipos ambiente antes de la apertura. El dispositivo de prueba es estable hasta la fecha de caducidad impresa
relacionados pero distintos (DEN1, 2, 3 y 4). Los virus son transmitidos por mosquitos de la familia en la bolsa. No congele el kit ni lo exponga a temperaturas superiores a 30°C.
Stegomyia que pican durante el día, principalmente el Aedes aegypti y Aedes albopictus. Hoy, más de RECOLECCIÓN Y MANIPULACIÓN DE LA MUESTRA
2.5 billones de personas que viven en áreas tropicales de Asia, África, Australia, y las Américas
están en riesgo de infectarse por Dengue. Se estima que 100 millones de casos de fiebre del dengue y Considere todos los materiales de origen humano como infecciosos y manipúlelos siguiendo los
250,000 casos de dengue hemorrágico se producen anualmente en el mundo1-3. procedimientos de bioseguridad.

El método más común para el diagnóstico de la infección con el virus del dengue es la detección Paso 1: Para todas las muestras: Recolecte sangre venosa mediante venopunción en un tubo de
recolección que contenga EDTA, citrato o heparina para muestras de plasma o sangre, o un
serológica. La IgM anti-dengue comienza a aparecer 3 días después de la exposición inicial y permanece
tubo de recolección que no contenga anticoagulantes para muestras de suero.
en circulación por aproximadamente 30-60 días. Los niveles de IgG anti-virus dengue se
elevan alrededor de los 7 días, alcanza el máximo a las 2-3 semanas y persiste durante toda la vida 4-6. Paso 2: Para muestras de sangre: Analice inmediatamente o almacene refrigerada a 2-8°C por
La detección de antígenos, como el dengue NS1, liberados durante la replicación del virus en el paciente hasta 24 horas después de la recolección. No congele las muestras.
infectado muestra resultados muy prometedores; permite el diagnóstico desde el primer día después de Para preparar plasma: Centrifugue la muestra recolectada y extraiga cuidadosamente el
la aparición de fiebre hasta el día 9, una vez que la fase clínica de la enfermedad termina, lo que permite plasma en un nuevo tubo previamente etiquetado.
un diagnóstico y tratamiento tempranos7.
Para preparar suero: Permita que la sangre coagule, centrifugue la muestra recolectada y
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM detecta los anticuerpos IgG y IgM contra el virus del extraiga cuidadosamente el suero en un nuevo tubo previamente etiquetado.
dengue y el antígeno NS1 circulante (DEN1, 2, 3 y 4) en suero, plasma y sangre total humanos. Puede Paso 3: Sólo para plasma/suero: Analice las muestras inmediatamente después de la recolección o
ser ejecutado en 20-25 minutos por personal mínimamente calificado sin necesidad de equipos de almacene refrigeradas a 2-8°C por hasta 5 días. Las muestras se pueden congelar a -20°C
laboratorio. para un almacenamiento más prolongado. Evite múltiples ciclos de hielo-deshielo.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA Antes de analizarlas, lleve las muestras congeladas a temperatura ambiente lentamente y
mezcle suavemente. Las muestras que contienen partículas visibles deben aclararse por
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM
centrifugación antes de la prueba.
contiene dos tiras reactivas (izquierda: prueba
IgG/IgM anti-Dengue; derecha: prueba Ag Dengue). Nota: Para evitar interferencias con la interpretación de los resultados, no analice muestras que
demuestren franca lipemia, hemólisis intensa o turbidez.
La Prueba Rápida Dengue IgG/IgM que está en la
parte izquierda, es un inmunoensayo cromatográfico Línea Control PROCEDIMIENTO
Línea de Ensayo IgM Línea Control
de flujo lateral. La tira consiste en: 1) una almohadilla Línea de Ensayo IgG Paso 1: Lleve los componentes de muestras y de prueba a temperatura ambiente, si fueron
Línea de Ensayo Ag
coloreada que contiene antígenos de membrana del refrigerados o congelados. Una vez que la muestra ha sido descongelada, mezcle bien antes
Pozo de Muestra
virus del dengue recombinantes conjugados con oro de realizar el ensayo.
coloidal (conjugados de Ag Dengue) y un anticuerpo ID de la Muestra
control conjugado con oro coloidal, 2) una membrana Paso 2: Cuando esté preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el dispositivo.
de nitrocelulosa que contiene dos líneas de ensayo Pozo de Buffer Pozo de Muestra Colóquelo sobre una superficie limpia y plana.
(líneas G y M) y una línea control (línea C). La línea Paso 3: Asegúrese de marcar el dispositivo con la identificación del paciente.
G está pre-recubierta con anticuerpos para la
detección de IgG anti-dengue, la línea M está pre-recubierta con anticuerpos para la detección de IgM Paso 4:
anti-dengue, y la línea C está pre-recubierta con un anticuerpo control. Para la Detección de Dengue IgG/IgM Para la Detección de Dengue Ag

La Prueba Rápida Ag de Dengue que está en la parte derecha es un inmunoensayo cromatográfico de 4.1 Llene el tubo capilar con 4.1 Llene el gotero de plástico con la muestra.
flujo lateral. La tira de la prueba consiste en: 1) una almohadilla coloreada que contiene anticuerpos suero/plasma/sangre total sin exceder la línea
4.2 Con el gotero en posición vertical, dispense
contra el antígeno de Dengue NS1 conjugados con oro coloidal (conjugados de Ac) y un anticuerpo de muestra como lo muestra la imagen.
2 gotas (aprox. 60 µL) de suero/plasma o 2
control conjugado con oro coloidal, 2) una membrana de nitrocelulosa que contiene la línea de prueba 4.2 Con el tubo capilar en posición vertical, gotas (aprox. 70 µL) de sangre total en el
(línea T) y la de control (línea C). La línea T está pre-recubierta con anticuerpos contra el antígeno NS1, dispense la muestra (5 µL) en el centro del pozo de muestra (pozo S) asegurándose de
y la línea C está pre-recubierta con un anticuerpo control. Los anticuerpos contra NS1 reconocen los pozo de muestra (pozo S) asegurándose de que no haya burbujas.
antígenos de los cuatro serotipos del virus del dengue. que no haya burbujas.
Inmediatamente agregue 1 gota (30-40 µL)
Cuando se adiciona un volumen adecuado de muestra al pozo de muestra del casete, la muestra migra Inmediatamente agregue 3 gotas (aprox. 90- de diluyente de muestra en el pozo de
por acción capilar a través del casete. Si el antígeno NS1 del dengue está presente en la muestra se 120 µL) de diluyente de muestra dentro del muestra (pozo S) con la botella en posición
une con los conjugados de dengue Ab. El inmunocomplejo es entonces capturado por la membrana pre- pozo de buffer (pozo B) con la botella en vertical.
recubierta de anticuerpos contra antígeno NS1, formando una línea T coloreada. Si los anticuerpos IgG posición vertical.
y/o IgM anti-dengue están presente en la muestra, se unirán con los conjugados Dengue Ag. El
inmunocomplejo es capturado por el reactivo recubierto y se colorean una línea coloreada en la línea G
y/o M, respectivamente.
Resultados positivos de dengue Ag sugieren una infección activa. Resultados positivos de dengue IgM
o
sugieren una infección primaria. Resultados positivos de dengue IgG sugieren una infección secundaria
o pasada, y resultados positivos de dengue IgG e IgM sugieren una infección primaria avanzada o una o
infección secundaria temprana. Los resultados obtenidos con esta prueba deben usarse junto con otros Línea de Línea de
procedimientos de diagnóstico y hallazgos clínicos. muestra muestra
La ausencia de las líneas G, M y T sugiere un resultado negativo. Cada tira contiene un control interno
(línea C), la cual debe mostrar una coloración por la formación de inmunocomplejos de anticuerpos 2 gotas de muestra al pozo S
control en la parte izquierda y derecha del panel, independientemente del color en las demás líneas. Si 5 µL de muestra al pozo S
esta línea no se colorea, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe ser analizada de nuevo
con otro dispositivo. Un resultado no válido en un panel no invalida el resultado de la prueba en el otro
panel.
REACTIVOS Y MATERIALES SUMINISTRADOS
1. Bolsa de aluminio sellada que contiene:
a. Un dispositivo de casete
b. Un desecante
2. Tubos capilares de 5 µL (para la prueba Dengue IgG/IgM)
3. Goteros de plástico (para la prueba Dengue Ag)
4. Diluyente de Muestra (REF SB-R0062, 5 mL/botella)
5. Instrucciones de Uso 1 gota de diluyente de muestra al pozo S
3 gotas de diluyente de muestra al pozo B
MATERIALES QUE PUEDEN SER REQUERIDOS Y ESTAN DISPONIBLES PARA LA COMPRA 20 minutos 20 minutos
1. Control para la prueba rápida Positivia Dengue Ag (Cat # C0063) que contiene control positivo y
control negativo. Resultado
Resultado
MATERIALES REQUERIDOS PERO QUE NO SE SUMINISTRAN
Paso 5: Cuente el tiempo.
1. Reloj o cronómetro
2. Dispositivo de punción para la prueba de sangre completa Paso 6: Lea los resultados a los 20-25 minutos. Los resultados positivos pueden ser visibles a partir
de 1 minuto. Los resultados negativos deben ser confirmados solo al final de los 25 minutos.
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Sin embargo, cualquier interpretación de los resultados fuera de los 20-25 minutos
Para uso de Diagnóstico in Vitro deben ser considerados inválidos y la prueba debe repetirse. Después de interpretar
1. Lea estas instrucciones de uso completamente antes de la realización de la prueba. Se pueden los resultados, deseche el dispositivo según las normas locales.
generar resultados erróneos si no se siguen las instrucciones correctamente. CONTROL DE CALIDAD
2. No abra el empaque sellado hasta que no se vaya a realizar la prueba.
3. No use los dispositivos si se encuentran vencidos.

Derechos de Autor 2020 por CTK Biotech, Inc.

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1. Control Interno: Esta prueba contiene un control interno, la banda C. Esta debe aparecer estudiado mediante la adición de estas sustancias a muestras de suero positivas y negativas
después de adicionarse la muestra y el diluyente. Si la línea C no aparece, revise el enriquecidas con antígeno dengue NS1, dengue IgG e IgM, respectivamente. Los resultados
procedimiento y repita la prueba con un nuevo dispositivo. demuestran que, a las concentraciones probadas, las sustancias estudiadas no afectan el
rendimiento de la Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM.
2. Control Externo: Las Buenas Prácticas de Laboratorio recomiendan el uso de controles
externos, positivos y negativos, para asegurar el funcionamiento adecuado de la prueba, Lista de químicos de interferencia potencial y concentraciones analizadas:
particularmente en las siguientes circunstancias: 1. Albúmina 60 g/L 6. Heparina 3,000 U/L
a. Cuando un nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese las muestras. 2. Bilirrubina 20 mg/dL 7. Ácido Salicílico 4.34 mmol/L
b. Cuando se inicia un nuevo kit. 3. Creatinina 442 µmol/L 8. Citrato de sodio 3.8%
c. Un nuevo envío de kits es utilizado. 4. EDTA 3.4 µmol/L 9. IgG Humano 1,000 mg/dL
d. Cuando la temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2-30°C. 5. Glucosa 55 mmol/L
e. La temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15-30°C.
7. Efecto de Gancho de Dosis
f. Para verificar una frecuencia mayor que la esperada de los resultados positivos o negativos.
No se detectó ningún efecto de gancho con la concentración de antígeno NS1 del dengue hasta
g. Para investigar la causa de resultados no válidos repetidos.
200 μg/mL.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1. RESULTADO NEGATIVO: 2. INVALIDO:
1. Las instrucciones dadas en las secciones “Procedimiento” e “Interpretación de los Resultados”
Si solo se colorea la línea C, la Si la línea C no se colorea, la prueba es
deben seguirse cuidadosamente al evaluar la presencia de anticuerpos contra el dengue y de
ausencia de las líneas G, M o T indica inválida independientemente de que se
su antígeno NS1 en suero, plasma o sangre total. Cualquier falla en el procedimiento puede
que ni los anticuerpos anti-Dengue ni el coloree las demás líneas G, M o T. Se
llevar a resultados erróneos.
antígeno NS1 del virus del Dengue están debe repetir la prueba en un nuevo
2. La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM se limita a la detección cualitativa de
presentes. El resultado es Negativo o No- casete.
anticuerpos contra el virus del Dengue y su antígeno NS1 en suero, plasma o sangre total
reactivo. humanos. La intensidad de la banda de prueba no tiene correlación con el título de
anticuerpos o de antígeno NS1 en la muestra.
3. Esta prueba no brinda información sobre el serotipo(s) del virus del dengue presente en una muestra.
4. Un resultado negativo o no-reactivo indica la ausencia de niveles detectables de anticuerpos
contra el virus del dengue o el antígeno NS1, pero no excluye la posibilidad de exposición o
infección con el virus del dengue.
5. Un resultado negativo o no-reactivo puede ocurrir si la cantidad de anticuerpos contra dengue o
el antígeno NS1 del dengue presentes en la muestra son inferiores al límite de detección de la
prueba, o si los anticuerpos o antígeno detectados no están presentes en el estadio de la
infección cuando es recolectada la muestra. Por ejemplo, algunos pacientes no producen niveles
detectables de IgM durante fases tempranas de la infección primaria o infecciones repetidas.
6. La infección puede progresar rápidamente. Si los síntomas persisten y la Prueba Rápida OnSite
Duo Dengue Ag-IgG/IgM da resultado negativo o no-reactivo, es recomendable ensayar con
3. RESULTADO POSITIVO: otro método, como PCR o ELISA.
IgG IgM IgG/IgM Ag Ag/IgM Ag/IgG/IgM 7. Algunas muestras que contengan títulos inusualmente altos de anticuerpos heterófilos o factor
Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo reumatoideo pueden afectar los resultados.
8. Los resultados obtenidos deben ser interpretados junto con otros métodos diagnósticos y la
sintomatología del paciente.
REFERENCIAS
1. Gubler DJ, Clark GG. Dengue/dengue hemorrhagic fever. The emergence of a global health
problem. Emerg Infect Dis 1995;1(2):55–7.
2. Gubler DJ, Trent DW. Emergence of epidemic dengue/dengue hemorrhagic fever as a public
health problem in the Americas. Infect Agents Dis 1993; 2:383–93.
3. Monath TP. Dengue: the risk to developed and developing countries. Proc Natl Acad Sci U S A
1994;91:2395–400.
4. Price DD, Wilson SR, "Severe Dengue Infection." Medscape Reference Drugs, Diseases &
Procedures, May 2011. Web. http://www.emedicine.com/EMERG/topic124.htm.
Las muestras con resultados positivos deben ser confirmadas con métodos alternativos y junto con
5. Innis BL, and Nisalak A, et al: An enzyme-linked immunosorbent assay to characterize dengue
la sintomatología clínica antes de hacer una determinación diagnóstica.
infections where denude and Japanese encephalitis co-circulate. Am J Trop Med Hygiene 1989:
CARACTERISTICAS DE DESEMPEÑO 40: 418-27.
6. Anonymous. Dengue hemorrhagic fever: diagnosis, treatment, prevention and control. 2nd ed.
1. El límite de Detección
Geneva: World Health Organization, 1997.
La Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM puede detectar la proteína NS1 en los 4 tipos
7. Alcon S, Talarmin A., Debruyne M., et al: Enzyme-linked immunosorbent assay specific to
del lisado del virus dengue I, II, III, y IV. El límite de detección es 0.25 ng/mL determinado con el
Dengue virus type 1 nonstructural protein reveals circulation of the antigen in the blood during the
antígeno NS1 recombinante del dengue del serotipo 2 (DEN2).
acute phase of disease in patients experiencing primary or secondary infections. J Clin Microbiol,
2. Desempeño Clínico para la prueba de Ag 2002, 40: 376–81.
Se recolectó un total de 350 muestras de sujetos susceptibles y sujetos de control sanos
Índice de Símbolos
normales, y se analizaron mediante la Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM y
mediante un ensayo comercial Dengue Ag ELISA. La comparación para todos los sujetos se Consulte las Solo para uso diagnóstico Fecha de
muestra en la siguiente tabla: instrucciones de uso in vitro vencimiento
Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Número de catálogo Número de lote Ensayos por kit
Prueba de Ag EIA Positivo Negativo Total
Positivo 117 0 117 Almacenar entre 2- Representante autorizado No reutilizar
Negativo 1 232 233 30°C
Total 118 232 350
Fabricante Fecha de manufactura
Sensibilidad Relativa: 100% (95% CI: 96.8-100%)
Especificidad relativa: 99.6% (95% CI: 97.6-99.9%)
Acuerdo General: 99.7% (95% CI: 98.4-99.9%)
3. Desempeño Clínico para la prueba de IgG SIMPLIFYING DIAGNOSTICS

Un total de 326 muestras de sujetos susceptibles, fueron evaluadas con la Prueba Rápida CTK Biotech, Inc. MDSS GmbH
OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM y un ensayo comercial Dengue IgG EIA. La comparación se 13855 Stowe Drive Schiffgraben 41
muestra en la siguiente tabla: Poway, CA 92064, USA 30175 Hannover, Germany
Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Tel: 858-457-8698
Prueba de IgG EIA Positivo Negativo Total
Fax: 858-535-1739
Positivo 36 1 37 E-mail: info@ctkbiotech.com
Negativo 2 287 289
PI-R0062C-Spanish Rev. L1.0
Total 38 288 326
Fecha de publicación: 2020-09-15
Sensibilidad Relativa: 97.3% (95% CI: 86.2-99.5%)
Especificidad Relativa: 99.3% (95% CI: 97.5-99.8%)
Versión en español
Concordancia: 99.1% (95% CI: 97.3-99.7%)
Solo para exportación. No para la re-venta en los E.U.A.
4. Desempeño Clínico para la prueba de IgM
Un total de 314 muestras de sujetos susceptibles, fueron evaluadas con la Prueba Rápida
OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM y un ensayo comercial Dengue IgM EIA. La comparación se
muestra en la siguiente tabla:
Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM
Prueba de IgM EIA Positivo Negativo Total
Positivo 31 1 32
Negativo 3 279 282
Total 34 280 314
Sensibilidad Relativa: 96.9% (95% CI: 84.3-99.4%)
Especificidad Relativa: 98.9% (95% CI: 96.9-99.6%)
Concordancia: 98.7% (95% CI: 96.7-99.5%)
5. Reactividad cruzada
No se observaron resultados positivos falsos de dengue en Ag, IgG e IgM en 1-10 muestras
positivas de los siguientes estados de enfermedad:
Chikunguña CMV VHA VHB VHC
VIH hCG H.pylori TB T. gondii
Tifoidea Rubéola ANA HAMA FR (hasta 8,400 IU/mL)
6. Interferencia
Sustancias comunes (como medicamentos para el dolor y la fiebre y componentes de la sangre)
pueden afectar el rendimiento de la Prueba Rápida OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM. Esto fue
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