ESCUELA PROFESIONAL DE

INGENIERÍA QUÍMICA
ESPECTROSCOPÍA UV-VIS
COMPONENTES ÓPTICOS

Curso : ANÁLISIS INSTRUMENTAL

Docente : Ing. Mg. RICARDO RODRIGUEZ VILCHEZ

SEMESTRE ACADÉMICO
Agosto del 2023 2023 B

MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS DE
ANÁLISIS 2

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 1

 MÉTODOS ÓPTICOS

Se define Métodos Ópticos de análisis aquellos, que miden la radiación

electromagnética que emana de la materia ó que interacciona con ella. Se
incluyen, todos los campos del espectro electro - magnético desde los rayos
gamma a las ondas de radio.

MÉTODOS ÓPTICOS ESPECTROSCÓPICOS

Basados en la medida de la Intensidad y la Longitud de onda de la energía

radiante.
La característica común a todos los métodos espectroscópicos es que se miden
espectros y además, que estos espectros son debidos a transiciones entre
estados de energía característicos.

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 2

 MÉTODOS ÓPTICOS NO ESPECTROSCÓPICOS

No miden espectros, ni están relacionados con las transiciones entre estados de

energía característicos, se basan en una interacción entre la radiación
electromagnética y la materia que produce como resultado un cambio en la
dirección o en las propiedades físicas de la radiación electromagnética.
Ejemplo: La refracción, difracción y polarización.

ESPECTROFOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR UV-VIS

Einstein: La radiación electromagnética está constituida por partículas

discretas llamadas “ FOTONES” que tienen energías definidas y se desplazan
en el espacio con la velocidad de la luz.
El uso de la dualidad partícula-onda para la explicación del funcionamiento del
electrón como naturaleza de la radiación electromagnética.

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 La energía radiante se produce o se absorbe siempre en múltiplos de una
unidad denominada “CUANTO”.
Para la producción de radiación un átomo a una molécula debe perder energía y
recíprocamente cuando se absorbe la reacción un átomo a una molécula gana
energía.
𝑐
𝐸 = ℎ𝑣 = ℎ 𝜆
E = ergios (erg)
 = ciclos / seg
h = Planck: 6.6256x10-27 erg/seg.
7

ONDA ELECTROMAGNÉTICA

Longitud de onda (). Distancia en línea recta a lo largo de la línea de

propagación entre dos puntos que están en dos ondas adyacentes.
Å=0.1 m=104=107mm=10-8cm=10-10m.
Frecuencia(). Número de oscilaciones por segundo, descritas por una onda.
Hertz = ciclo/seg  = c/ c = velocidad de la luz en el vacío
2.9979 x1010 cm/seg.
ത Número de ondas por centímetro.
Numero de Onda (𝑉).
Unidad: cm-1 𝑣ҧ = 1/𝜆 8

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 COLOR - COLORIMETRÍA

Color. Respuesta a una serie de estímulos combinados.

Físicos, químicos, biológicos. De ciertas partes de la retina del ojo para la
energía radiante de determinadas longitudes de onda.
Colorimetría. Para designar la medida de la fracción de “LUZ BLANCA”, de
una lámpara incandescente que pasa a través de un medio líquido o disolución.

Ejemplo 1:
Fe+3 + KSCN ⟶ FeSCN+2
Color rojo (en disolución)
 = 480 nm Absorbe onda corta (azul)
Transmite onda larga (rojo)
Ejemplo 2:
Disolución de Cu(NH3)4++ es azul.  = 650 nm
Absorbe ondas largas (rojo)
Transmite ondas cortas (azul)
10

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 Ejemplo 3:
Disolución de KMnO4 es púrpura.
Absorbe ondas intermedias (verde, amarillo)
Transmite ondas cortas (azul) 𝜆 = 525 𝑛𝑚
Transmite ondas largas (rojo)
El color aparente de la solución es siempre el complemento del color
absorbido.
Es posible determinar una sustancia que sea incolora o muy poco coloreada, al
agregar un reactivo que lo convierta en un compuesto intensamente coloreado.

11

11

EL ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

• La radiación electromagnética, puede considerarse como una forma de

energía radiante que se propaga como una onda transversal. Vibra
perpendicularmente con respecto a la dirección de propagación y esto
imparte un movimiento ondulatorio a la radiación.

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 1022Hz Frecuencia 103 Hz

Micro ondas
Rayos  Rayos X UV IR Radio

Visible 400 – 800 nm

(radar)
Rayos  Longitud de Onda
(gamma)
c 1 pm
Rayos X Ultravioleta Infrarrojo Microondas Ondas de
1 pm – 10 10 – 400 nm 0.8  - 1 nm 0.1 – 50 cm. radio
nm > 50 cm.

Amarillo
UV Violeta Azul Verde Anaranjado Rojo IR

400 500 600 700 nm

13

13

ABSORCIÓN DE LA RADIACIÓN

Para comprender cualitativamente la absorción de la radiación se considerará la

absorción en la región visible. Los objetos “se ven” porque transmiten o
reflejan sólo una porción de luz de esta región. Una luz policroma(luz
blanca),que contiene todo el espectro de longitudes de onda de la región visible,
se hace pasar a través de un objeto, el objeto absorbe algunas longitudes de
onda y transmite las longitudes que no absorbe.

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 Estas longitudes de onda residuales que se transmiten se ven como color. El
color será complementario de los colores absorbidos.
COLORES DE LAS REGIONES DE LONG. ONDA
Long Color Color
Absorbida(nm) Absorbido Complementario
380-450 Violeta Amarillo verdoso
450-495 Azul Amarillo
495-570 Verde Violeta
570-590 Amarillo Azul
590-620 Naranja Verde-azulado
620-750 Rojo Azul-verdoso
15

15

TRANSMISIÓN - EXTINCIÓN

P0 haz de radiación de potencia, incide en el bloque perpendicular a la

superficie, después de atravesar un trecho b del material. Su potencia se reduce
a P por absorción.
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 Ing. Mg. Ricardo Rodríguez Vílchez 17

17

dP= Potencia absorbida en el nivel P

𝑑𝑃
= 𝜅𝑝 dn = número de moléculas absorbentes
𝑑𝑛
 =constante de proporcionalidad
𝑝 𝑁
𝑑𝑝 Signo (-) Debido a que el poder radiante decrece a medida
න = 𝜅 න 𝑑𝑁
𝑃0 𝑝 0
que la cantidad de radiación absorbida aumenta.
N = número de moléculas absorbentes donde la potencia
𝑃
𝐼𝑛 = = −𝜅𝑁 se reduce a P.
𝑃0
P0 =Potencia radiante que entra en la celda.
18

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 S = rayo transversal en cm2.
𝑃 Ns = número de partículas efectivas que absorben
𝐼𝑛 = = −𝜅𝑁𝑆
𝑃0 la radiación.

𝑃 Ns = b = c = Proyecto de la concentración (c) y

𝐼𝑛 = 𝜅′′𝑏𝐶
𝑃0 longitud de trayectoria (b)
’’ = unidades de masa por unidad de área
𝑃0
log = 𝐴 = 𝑎𝑏𝑐 transversal.
𝑃
Reemplazando ’’ por la constante a, que incluye
𝑃0
log = 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 el factor de conversión de los logaritmos naturales.
𝑃
𝑃0
Se ha invertido para eliminar el signo (-) 19
𝑃
19

LEY DE LAMBERT (1760)

Establece que para un haz paralelo de radiación monocromática penetra en un

medio absorbente al plano paralelo A la superficie de medio disminuye la
intensidad del haz luminoso que penetra en la capa en una fracción constante.

𝐼0
log = 𝜅𝑏
𝐼
 constante que depende  longitud de onda
Naturaleza del medio
Tipo de molécula
Espesor de la celda que contiene la sustancia
absorbente.
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 LEY DE BEER (1852)

Establece que la intensidad de un haz de radiación monocromática paralela

disminuye exponencialmente a medida que la concentración del material
absorbente aumenta.
𝐼0 𝐼0
log = 𝜅𝐶 log = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎
𝐼 𝐼
𝐼𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
Lambert – Beer 𝐴 = log 𝐼 I0 igual para ambos casos.
𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
𝐼𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜
𝐴 = log 𝐼 = 𝑎𝑠 𝑏𝐶
𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
𝐴𝑠
𝑎𝑠 = 𝑏𝐶(𝑔𝑟/𝑙𝑡) (𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑡𝑖𝑣𝑖𝑑𝑎𝑑)
21

21

as = Índice de absorbancia
As = Absorbancia de la solución
b = Espesor de la celda, cm.
C = Concentración
𝐴𝑠
𝜀= (𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛𝑚𝑜𝑙𝑎𝑟)
𝑏𝐶(𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠/𝑙𝑡)
𝐼0
log10 = = 𝜀𝑏𝐶 → 𝐴 = 𝜀𝑏𝐶
𝐼
A= abC
T= 10-abC
= axM
A= lt/grcm 22

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 Absorbancia (A): log en base 10 del recíproco de la transmitancia (T) en el que
el disolvente puro es el material de referencia.

𝐴 = log10 1ൗ𝑇 = − log10 𝑇

Transmitancia (T): Relación entre el poder de radiación transmitido por la
muestra (P) y el poder de radiación que incide sobre la muestra.
𝑃
𝑇=𝑃 𝑇 = 10−𝑎𝑏𝐶
0

A = bC 𝐴 = − log% 𝑇
𝑃
A = abC %𝑇 = 𝑥100
𝑃0 23

23

Absortividad (a): Constante que depende de la longitud de onda de la

radiación y es característica para una combinación (soluto – solvente) sus
unidades dependen de b y C.
b = cm C = gr/lt a = lt/gr cm
Absortividad molar (): Absortividad cuando la concentración se expresa en
moles/lt y el paso de luz 1 cm
 =lt/mol cm
(1760) Lambert: P=P0x10-k’b. . . . . . . . . . (1)
(1852) Beer: P= P0x10-’’C. . . . . . . . (2)
24

24

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 Lambert – Beer:
P = P0x10-abC . . . . . . . . . (3)
b = Trayecto óptico
P0 = Flujo luminoso inicial
El proyecto de la absortividad y el peso molecular de una sustancia se
denomina Absortividad molar () usada para comparar cuantitativamente la
absorción de varias sustancias de peso molecular conocido.
 = axPM
A = bC ó A = abC
25

25

ULTRAVIOLETA Y VISIBLE

Regiones UV-VIS del espectro y tipos de bandas de absorción más frecuentes.

26

26

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 UV lejano (10 – 200 nm)
UV. Próximo (200 – 400 nm)
• Llamado UV de vacío, porque el oxígeno absorbe por debajo de 200 nm y es
preciso eliminarlo (pasando nitrógeno).
• Para interpretar y comprender los espectros electrónicos es necesario tener
en cuenta que tipo de transiciones electrónicas puede tener lugar cuando se
absorbe radiación UV o VIS.
• En esta región se pueden dar bandas de absorción (sin tener en cuenta los
espectros de resonancia de carga y resonancia electrónica de los iones y
radicales orgánicos inestables) que se deben a las transiciones electrónicas: 27

27

* antienlazante
 →*
* antienlazante
ENERGÍA

→ * n → *
n no enlazante

 enlazante

 enlazante

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 14

 Los valores  para las transiciones están en orden:
n→* <  →* n → * < <  → *
Banda de Absorción  → * y n → *
Es conveniente tratar simultáneamente las transiciones →* y las n → * ya
que muchos grupos poseen electrones n y  y ambos pueden contribuir al
espectro UV-VIS.
Todos los enlaces múltiples C = C, C  C, C=N poseen electrones  y todos
los átomos que están situados a la derecha del carbono en la Tabla Periódica
como Nitrógeno, Oxígeno, Azufre y halógenos, poseen electrones n.
29

29

En las moléculas los electrones de valencia que no forman parte de enlaces

químicos se conocen como electrones NO ENLAZANTES (No compartidos)
o “n”. Presenta absorciones →* y n → * el grupo carbonilo.

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 Máximos de Absorción de ∥ത⟶∥෨∗ y 𝓷 ⟶∥෨∗ para grupos funcionales

Transición, nm
Grupo Funcional ∥ത⟶∥෨∗ 𝓃 ⟶∥෨ ∗

170 No Absorbe

170 No Absorbe

166 280

190 300

340

500

665

31

31

La tabla indica las longitudes de onda correspondientes al máximo de

absorción, max, para las transiciones →* y n → * de varios grupos
funcionales.
Destacamos que max es independiente de la naturaleza de los átomos que
intervienen en el enlace múltiple para las transiciones -→*; ésta, está
influida por ella en el caso de las transiciones n → *.

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 16

 Esto se explica teniendo en cuenta que mientras que los electrones  están
localizados y son independientes de los átomos que forman el enlace, los
electrones n están cada uno asociado a su átomo y un aumento en la
electronegatividad de éste implica que los electrones no compartidos (o
electrones 𝑛 sean atraídos por el primer átomo lo que supone un
desplazamiento de max, hacia longitudes de onda mas cortas observándose al
comparar las longitudes de onda de absorción de los grupos C = S, C = n y
C = 0.

33

33

Estos datos son aproximados, ya que los sustituyentes influyen en la longitud

de onda en las transiciones →* y especialmente en la de las n → * .
Ejemplo:
max para transiciones →* del CH3COCH3 es 272 nm mientras que para el
CH3CHO es 294 nm.

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 17

 Sistema con electrones 
Poseen enlaces dobles y sencillos de forma alternada.
Ejemplo, - C = C – C = C ó -C=C–C=0
La conjugación produce un desplazamiento, de la transiciones  → *, hacia
longitudes de onda más largas y un aumento de intensidad, que es función del
grado de la conjugación.

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35

36

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 18

 Las tablas muestran que la conjugación desplaza la banda intensa
correspondiente a la Transición →* para el estudio de sistema aromáticos y
conjugados.
La p-benzoquinona en la banda de absorción n→* entra en la zona
correspondiente al azul del espectro visible, para entra en la zona
correspondiente al azul del espectro visible, 435 nm. Los compuestos
orgánicos coloreados poseen siempre una conjugación considerable.

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37

CROMÓFOROS

Grupo de átomos responsables de bandas de absorción en las regiones UV ó VIS.

Los sistemas con electrones  son cromóforos en las regiones UV-VIS.
Los sistemas con electrones  son cromóforos en la región UV lejano (de vacío)
Grupos absorbentes dentro de una molécula.

AUXÓCROMOS
Grupos saturados que, cuando se unen a grupos cromóforos, desplazan su banda de
absorción hacia longitudes de onda mayores y aumenta la intensidad del pico.

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 19

 Grupos auxócromos comunes:
Hidróxilo, amino, sulfhídrico, halógenos.
Todos estos grupos poseen electrones no enlazantes y su efecto se atribuye a
transiciones n→*
Efecto auxocrómico en la molécula de benceno
El anillo bencénico es un grupo cromóforo con max a 255 nm y =230
(→*) y la sustitución de uno de sus hidrógenos por un grupo –OH da lugar
a una banda con max a 270 nm y =1450.

39

39

Efecto batocrómico – desplazamiento hacia el rojo

Desplazamiento del máximo de absorción hacia longitudes de ondas mayores.
Los espectros de los iones y radicales libres (efecto batocrómico) con relación a
los de sus correspondientes moléculas no disociadas y neutras. Por ello es
frecuente que iones o radicales cuyas moléculas neutras (no disociadas) sean
incoloras, presenten coloración.
Efecto Hipsocrómico – Desplazamiento hacia el azul
Desplazamiento hacia longitudes de onda más cortas.
Efecto hipercrómico. Es el aumento en la intensidad de la absorción.
Efecto hipocrómico. Es una disminución en la intensidad de la absorción. 40

40

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 20

 Comportamiento individual de los cromóforos
Los cromóforos  pueden unirse en una molécula de tres formas:
1. Si dos cromóforos A y B están unidos directamente, el espectro no,
normalmente es distinto que los espectros de A y B, ya que A – B debe
considerarse como un nuevo cromóforo.
Ejemplo:
Grupo etileno (C = C) max cerca de 170 nm,  = 1000
Grupo aleno (C=C=C) max cerca de 225 nm,  = 500

41

41

Si los dos cromóforos están conjugados, separados por un enlace sencillo,

cada cromóforo tiende a mantener su individualidad.
Si los dos cromóforos están separados por mas de un enlace sencillo, los
electrones  se dice que están aislados y el espectro es prácticamente la
suma de los de A y B.
Banda de Absorción  →*
Los electrones sigma son los electrones enlazantes de los enlaces sencillos y las
transiciones →* se producen a causa de absorción del UV Lejano.

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 21

 Banda de absorción n → *
Un sustituyente con pares de electrones no compartidos introduce la
posibilidad de transiciones n → *
Los efectos mas comunes son compuestos saturados que contienen
heteroátomos tales como azufre, nitrógeno, bromo o yodo (Absorben la
longitud de onda de 200 nm) y compuestos con oxígeno o cloro (que absorben
a longitudes de ondas mas cortas.
Un aumento en la electronegatividad del heteroátomo produce un
desplazamiento del máximo de absorción hacia longitudes de onda más cortas,
debido a la mayor energía de unión de los electrones en estado fundamental. 43

43

El hecho de que la mayoría de los compuestos saturados que contienen

oxígeno, absorban por debajo de 200 nm permite utilizar, compuestos como
agua, alcoholes y éteres como disolventes en la zona del UV próximo.
Los análisis de absorción ultravioleta son bastantes sensibles y es posible
detectar sustancias a concentraciones tan bajas como 1 ppm.

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44

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 22

 LONGITUDES DE ONDA E INTENSIDADES PARA TRANSICIONES
𝛈 ⟶ 𝝈 ∗ MOLÉCULAS SATURADAS QUE POSEEN
HETEROÁTOMOS

Hereroátomos Compuesto max, nm max

– Cla CH3Cl 173 200
/
–O CH3OH 184 150
– Br CH3Br 204 200
 – Prr 208 320
–I CH3I 259 365
CH3I2 292 1320
CHI3 349 230
/ CH3NH 215 600
–O (CH3)3N
\ 227 820
/
(CH3)2S 210 1020
–S Et2S
215 1600
–S–S– C2H5S5C2H5 202 2100
45

45

EN RESUMEN

La espectroscopia molecular de absorción UV. Es muy útil en la identificación

de moléculas que contengan enlaces  o electrones n, tales como olefinas
conjugadas, compuestos orgánicos aromáticos y muchos productos naturales,
animales y vegetales. El método es sensible y los resultados reproducibles, pero
su aplicación al análisis cualitativo es muy limitada.

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46

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 23

 APLICACIONES DE LA ESPECTROSCOPÍA UV

Son determinaciones de:

1. Compuestos aromáticos polinucleares de carácter cancerígeno.
2. Productos naturales, como esteroides o clorofila.
3. Vitaminas .
4. Diferenciar estructuras tales como la aromática, quinónica.
5. Constituyente de diversas partes de las plantas (polen, raíces).
6. Tejidos animales y otras partes del cuerpo.
47

47

7. En agricultura: determinación de pesticidas en plantas, ríos y animales que

comen y beben sustancias contaminadas.
8. Todos los productos como drogas y barbitúricos comunes.

48

48

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 24

 DESVIACIÓN DE LA LEY DE BEER - LAMBERT

1. La absorbancia varía en forma no lineal respecto a la concentración.

2. Se requiere de una curva de calibración trazada con valores de muestras de
concentración conocida.
3. La concentración de las especies absorbentes es tan alta haciendo que el
índice de refracción de la radiación absorbida varíe.
4. Concentraciones requeridas para que se cumpla la ley de B-L, indica que
deberán ser inferiores a 10-2 M.
5. Controlar su temperatura, pH (OH-, H3O+). 49

49

6. Las absorbancias de dos o más sustancias de una misma solución son

aditivas, siempre que no haya reacción entre ellas o interacciones.
7. Se puede cuantificar 2 o mas sustancias en mezcla siempre que ninguna de
ellas absorba a la longitud () de máxima absorción de la otra
apreciablemente.
8. Cuando cada uno de los dos solutos absorbe apreciablemente a  (long. de
onda) de absorción máxima del otro, es posible plantear dos ecuaciones
simultaneas y resolver la concentración de cada sustancia, puesto que las
absorbancias son aditivas.
50

50

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 25

 𝐴𝜆1 = 𝐴𝐼𝜆1 + 𝐴𝐼𝐼
𝜆1
= 𝜀𝐼𝜆1 𝑏𝐶𝐼 + 𝜀𝐼𝐼𝜆1 𝑏𝐶𝐼𝐼 . . . (1)
𝐴𝜆2 = 𝐴𝐼𝜆2 + 𝐴𝐼𝐼
𝜆2
= 𝜀𝐼𝜆2 𝑏𝐶𝐼 + 𝜀𝐼𝐼𝜆2 𝑏𝐶𝐼𝐼 . . . (2)
Donde:
A1 y A2 Absorbancias de la mezcla a longitud de onda 1 y 2.
AI1 y AI2 Absorbancias del componente I en la mezcla, a 1 y 2
AII1 y AII2 Absorbancias del componente II en la mezcla, a 1 y 2
𝜀𝐼𝜆1 , 𝜀𝐼𝜆2 , 𝜀𝐼𝐼𝜆1 , 𝜀𝐼𝜆1 , 𝜀𝐼𝐼𝜆2 Absorción Molar de los componentes I y II a 1 y 2
CI y CII Concentraciones respectivas de los componentes I y II
en la mezcla.
51

51

COMPONENTES DE LOS INSTRUMENTOS ÓPTICOS

1. Fuente estable de energía radiante.

2. Recipiente transparente para contener la muestra.
3. Selector de longitud de onda.
4. Detector de radiación.
5. Tratamiento y lectura de la señal.(Ej.)

52

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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 26

 53

53

COMPONENTES DEL ESPECTROFOTÓMETRO

Fuentes de radiación.
1. Haz de radiación con potencia suficiente en el rango de longitud de onda de
interés
2. Estable
Tipos:
• Fuentes continuas. Emiten radiación cuya intensidad varia sólo de forma
gradual en función de la longitud de onda.
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Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 27

 • Fuentes de líneas. Emiten un número limitado de bandas de radiación,
con un intervalo muy reducido de longitud de onda.
• Láser (Light amplification by stimulated emission of radiation).
Haces de radiación estrechos y muy intenso, altamente monocromático y
muy coherente.

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55

FUENTES DE RADIACIÓN

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56

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 28

 FUENTES CONTINUAS

• Producen un amplio intervalo de longitudes de onda.

• Sólido incandescente (Globar, hilo de nicromio) (1-40 μm).
• Lámpara de tungsteno (300 - 3000 nm).
• Lámpara de cuarzo de tungsteno y halógenos (QTH) (200-3000 nm).
▪ Alta temperatura (3500 K).
• Lámpara de deuterio D2 o lámpara- arco de Hg/Xe – (160-400 nm).

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57

FUENTES DE LÍNEAS

• Producen un número limitado de longitudes de onda.

• Lámpara de cátodo hueco:
▪ Cátodo bombardeado con electrones.
▪ Salto (sputtering) de átomos desde el cátodo.
▪ Emisión de r.em. a partir de los átomos excitado del cátodo.
• Lámpara de descarga sin electrodos.

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58

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 29

 SELECTORES DE
LONGITUD DE ONDA
Filtros
• Interferencia
▪ (UV, Vis, IR)
• Absorción (Vis)
▪ Absorben ciertas porciones del espectro mediante el uso de vidrios
coloreados o colorantes suspendidos en gelatina inmovilizada entre
platos de vidrio.
• Monocromadores.
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59

60

60

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 30

 MONOCROMADORES

En muchos métodos espectroscópicos, es necesario o deseable poder variar, de

forme continua y en un amplio intervalo, la longitud de onda de la radiación.
Varían la longitud de onda de la radiación en un amplio rango mediante un
proceso denominado scan o barrido.
Tipos:
• Rejilla
• Prisma
61

61

MONOCROMADOR DE RED DE CZERNEY-TUNER

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62

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 31

 MONOCROMADOR DE PRISMA DE BUNSEN

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63

TRANSDUCTORES

Convierten la energía radiante en una señal eléctrica.

Características:
• Alta sensibilidad
• Alta razón señal/ruido.
• Respuesta constante en un rango amplio de longitudes de onda
• Señal directamente proporcional a la potencia de radiación en ausencia de
radiación la señal debe ser cero (darck current).
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64

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 32

 Los transductores más utilizados para las regiones UV/Vis son:
• Celda fotovoltaica
• Fototubo
• Fotomultiplicador
• Fotodiodo ( serie de fotodiodos)

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65

CELDA FOTOVOLTAICA

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66

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 FOTOTUBO

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67

FOTO DIODO

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68

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 34

 DISPOSITIVO DE ACOPLAMIENTO DE CARGA (CCD)

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69

TIPOS DE INSTRUMENTOS ÓPTICOS

1. Espectroscopio: Instrumento óptico utilizado para la identificación visual de las

líneas de emisión.
2. Colorímetro: Instrumento para la medida de absorción en la que el ojo humano
sirve como detector usando uno o mas estándares de comparación de color.
3. Fotómetro: Instrumento para medidas de absorción (UV, VIS, IR)
Fluorímetro ( medidas de fluorescencia).
4. Espectrómetro: Instrumento que provee información sobre la intensidad de
radiación como función de la longitud de onda o frecuencia.
70

70

Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez 35

 EJEMPLOS

Espectroscopia Infrarroja

Espectroscopia de
Fluorescencia Molecular

71

71

ESPECTROMETRÍA ATÓMICA DE RAYOS X

Al igual que la espectroscopia óptica, se basa en la medida de la emisión,

absorción, dispersión, fluorescencia y difracción de la radiación
electromagnética.
Los métodos de fluorescencia y de absorción de rayos X son muy utilizados
para la determinación cualitativa y cuantitativa de todos los elementos de la
tabla periódica con números atómicos superiores al del sodio.

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 RAYOS X

Rayos X: radiación electromagnética de longitud de onda corta producida por

el frenado de electrones de elevada energía o por transiciones de electrones que
se encuentran en los orbitales internos de los átomos.

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PRODUCCIÓN DE RAYOS X

Si un electrón interior es expulsado, el hueco que se produce puede ser

ocupado por otro electrón mas externo.
La diferencia de energía se pone de manifiesto como una radiación X.
Esta diferencia se relaciona con el tipo de átomo, por lo que se relaciona
siempre con el número atómico Z .

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 VENTAJAS

1. Espectros sencillos.
2. Método no destructivo.
3. Análisis desde partículas a grandes objetos.
4. Velocidad.
5. Exactitud y precisión.

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DESVENTAJAS

1. Sensibilidad inferior que los métodos ópticos (0.01 a 100%)

2. No adecuado para elementos ligeros
3. Costos elevados

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 ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA
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DROGAS Y NARCÓTICOS COMUNES

Clasificación
Barbituratos Anfetaminas Alcaloides Alucinógenos
Amobarbital (Dexamil) Metanfetamina · HCl (Dexosin) Metadona Marihuana
Barbital Sulfato de anfetamina Cocaína Dietilamina del ácido
Butabarbital (Bencedrina) Morfina lisérgico (LSD)
Fenobarbital Sulfato de dextroanfetamina Quinina Mescalina
Pentobarbital (Dexedrina) Codeína
(Nembutal) Procaina
Secobarbital (Seconal) Heroína
Metripilon (Noludar) Fenacetina
Difenilhidantína (Empirina)
(Dilatina)
Glutetimida (Doriden)

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 BARBITURATOS

Se conocen como “depresores” y actúan como sedantes, constituyen el

compuesto de las pastillas para dormir de uso común.
El compuesto del cual proceden, el ácido barbitúrico, es inactivo, pero sus
derivados suelen tener propiedades farmacológicas.
Se han sintetizado miles de derivados, los más comunes son los que tienen
sustituyentes en el carbono número 5 del anillo, otros derivados se obtienen
mutilando los nitrógenos del anillo y sustituyendo al oxígeno por azufre en el
carbono número dos. 79

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Las formas ácidas (ceto) de los barbituratos son insolubles en agua pero
solubles en disolventes orgánicos, mientras que las sales (enoles) son solubles
en agua.
Una vez en el cuerpo, se transforman en la forma ácida y se absorben sobre las
proteínas del plasma.
El compuesto relacionado, la glutetinida (Doriden), también se incluye en la
mayoría de los procedimientos analíticos para barbituratos.

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 ANFETAMINAS

Actúan como “estimulantes” o “antidepresivos” los más comunes son

anfetamina y metanfetamina.
Estructuralmente son fenilisopropilaminas.
La forma anfetamina (dexedrina) es más activa que la forma racémica
(benzedrina).

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ALCALOIDES

Los narcóticos tienen la propiedad de crear adicción, de ser analgésicos y

provocar euforia. Los alcaloides del opio se usan con frecuencia, el principal
ingrediente activo del opio es la morfina.
Al acetilar los dos grupos hidróxilo (sustituyéndolos con grupos
𝑂 − 𝐶 − 𝐶𝐻3
acetilo: || se obtiene el derivado diacetilado
𝑂
de mayor solubilidad en agua, la heroína.
La metadona se emplea para rehabilitación de adictos.
La cocaína es el alcaloide que se deriva de las hojas de coca.
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 ALUCINÓGENOS

Parecidos a las anfetaminas, actúan como estimulantes pero a menudo

presentan efectos pocos comunes e impredecibles.
La marihuana, alucinógeno más antiguo y de mayor circulación, es un extracto
natural del cáñamo o planta cannabis sativa. Es una mezcla compleja de
compuestos cuya composición varía considerablemente de una a otra muestra.
Esto complica la química analítica y la detección suele basarse en examen
morfológico y no en métodos químicos.
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Compuestos llamados cannabinoides especialmente los tetrahidrocanabinoles.

El 9 – 3,4 – trans – THC (9 – THC) y el 8 – 3,4 – trans – THC (8 –
THC) siendo el 9 – 3,4 – trans – THC (9 – THC) es más abundante en la
marihuana.
Alucinógeno sintético es la dietilamida del ácido lisérgico (LSD).
No es fácil detectarla una vez que ha sido ingerida porque sólo se necesitan
microgramos para que tenga acción fisiológica.
Se degrada con rapidez en presencia de luz y calor, por lo que la muestra debe
manejarse con sumo cuidado.
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 Solo la forma D del LSD es activa. El LSD generalmente se encuentra como
tartrato u otra sal y no como compuesto puro.
Los sedantes (barbitúricos), tranquilizantes y compuestos neutros tienden a
concentrarse en la sangre, mientras que las anfetaminas y narcóticos (alcaloides)
se encuentran más concentrados en la orina.

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ESTRUCTURAS DE ALGUNAS DROGAS Y NARCÓTICOS

COMUNES

Barbiturato Anfetamina Morfina

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 Metadona LSD

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EJERCICIOS

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 1. Una disolución de permanganato de potasio tiene A=0.539 leído a 540 nm
(b=1 cm). Hallar su concentración.

Estándar KMnO4
Abs
(M)
0.03 0.162
0.06 0.330
0.09 0.499
0.12 0.670
0.15 0.840

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2. Determinar la concentración del Mn usando el método analítico, usando

0.03 mol/L y A= 0.162, si Ax = 0.539 .
𝐴 = 𝜀𝑏𝑐

𝐴 0.162 0.539
𝜀= = = 5.4 ⇛ 𝐶𝑥 = = 0.0998 ≅ 1 𝑚𝑜𝑙/𝐿
𝑏𝑐 0.03 5.4
Estándar KMnO4
Abs
(M)
0.03 0.162
0.06 0.330
0.09 0.499
0.12 0.670
0.15 0.840 90

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 3. Estándares de 𝐶𝑜 𝑁𝑂3 2 ∙ 6𝐻2 𝑂 − 2𝑥10−3 𝑀 (Patrón)
Cx10-3M 0.6 0.8 1.0 1.2 1.8
A 0.1784 0.2291 0.2924 0.3233 0.4948
Determinar la concentración en las muestras de A1=0.203 y A2=0.279.
Aplicando: 𝐴 = 𝜀𝑏𝑐
0.1784 1. Muestra A1=0.203
𝜀1 = 0.6𝑥10−3 = 297.3
0.2924
0.203 = 𝜀𝑏 ҧ 1 𝐶1
𝜀2 = 0.8𝑥10−3 = 286.3 0.203
𝐶1 = 284.04 = 7.14𝑥10−4 𝑀
0.2924
𝜀3 = 1.0𝑥10−3 = 292.4 2. Muestra A2=0.279
0.3233 0.279 = 𝜀𝑏 ҧ 1 𝐶1
𝜀4 = 1.2𝑥10−3 = 269.4 0.279
0.4948
𝐶2 = 284.04 = 9.82𝑥10−4 𝑀
𝜀5 = 1.8𝑥10−3 = 274.8
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4. Una disolución 5𝑥10−4 𝑀 de un colorante M produce una absorbancia de

0.301 a 530 nm y de 0.046 a 680 nm. Una disolución 5𝑥10−4 𝑀 de un
colorante N, tiene una absorbancia de 0.046 a 530 nm y 0.602 a 690 nm.
Una mezcla de ambos colorantes dio una absorbancia de 0.125 a 0.398 a 530
y 690, respectivamente. Determinar la concentración de M y N en la
mezcla.
𝐴𝜆1 = 𝜀𝑀 𝑏𝐶𝑏 + 𝜀𝑁 𝑏𝐶𝑁
𝐴𝜆2 = 𝜀𝑀 𝑏𝐶𝑏 + 𝜀𝑁 𝑏𝐶𝑁
𝐴 0.301 𝐴 0.046
530: 𝜀𝑀 = 𝐶𝑀 = 5𝑥10−4 = 602 𝜀𝑁 = 𝐶𝑁 = 5𝑥10−4 = 92
𝑀 𝑁
𝐴𝑀 0.046 𝐴𝑁 0.602
690: 𝜀𝑀 = = = 92 𝜀𝑁 = = 5𝑥10−4 = 1204
𝐶𝑀 5𝑥10−4 𝐶𝑁

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 Reemplazando:
0.125 = 602𝑏 1 𝐶𝑀 + 92𝑏 1 𝐶𝑁
0.398 = 92𝑏 1 𝐶𝑀 + 1204𝑏 1 𝐶𝑁

0.125 92
0.125 1204 − 0.398(92)
𝐶𝑀 = 0.398 1204 = = 0.158 𝑀
602 92 602 1204 − 92(92)
92 1204

602 0.125
602 0.398 − 92(0.125)
𝐶𝑀 = 92 0.398 = = 0.318 𝑀
602 92 602 1204 − 92(92)
92 1204

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PROBLEMAS
PROPUESTOS PARA
DESARROLLO EN
CLASE
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 I. El amoniaco puede determinarse espectrofotométricamente por reacción
con fenol en presencia de hipoclorito (OCl–)

Una muestra de 4.37 mg de proteína se digiere químicamente para convertir

en amoniaco todo el nitrógeno presente, después de este tratamiento, el
volumen de la muestra es de 100 mL. Luego, 10 mL de esta solución se
colocan en un matraz volumétrico de 50 mL y se tratan con 5 mL de
solución de fenol más 2 mL de solución de hipoclorito de sodio. La muestra
se diluye a 50 mL y la absorbancia se mide a 625 nm en una celda de 1.00
cm de espesor después de 30 minutos.
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Como referencia se prepara una solución patrón a partir de 1x10-2 gr de

NH4Cl disueltos en 1.000 L de agua. Después, 10 mL de esta solución
patrón se coloca en un matraz volumétrico de 50 mL y se analizan en la
misma forma que la muestra problema. El blanco se prepara utilizando
agua destilada en lugar del problema. Muestra
Absorbancia
observada a 625 nm
Blanco 0.140
Referencia 0.308
Problema 0.592
(a)Determinar la absortividad molar del producto azul.
(b)Calcular el % en peso de Nitrógeno en la proteína.
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 II. Calcular las incógnitas (X1 a X6) de la tabla si las absorbancias de los
solventes 1 a 4 se realizaron en celdas con camino óptico de 1.0 cm y los
compuestos i y j cumplen la ley de Beer.

Solución iM jM A(394 nm) A(502 nm) A(610 nm)

1 2.0 x 10-4 0 0.973 0.364 0.102
2 0 3.0 x 10-4 0.084 0.546 1.076
3 X1 X2 0.776 X3 0.934
4 X4 X5 0.812 0.602 X6

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