Esterilización
1. El sustrato para un fermentador con un volumen de 10.000 L debe esterilizarse. El sustrato contiene
105 células viables/ml. La probabilidad de contaminación aceptada es 1/1000 (se “permite” que se
contamine un lote de 1000). Determine el factor Del general (∇).
2. Desea esterilizar sustrato para un fermentador de 15 m3 (por lotes). El sustrato está contaminado
con 106 células viables/ml. La probabilidad de contaminación aceptada es 1/100 (se “permite”
contaminar un lote de 100).
a) Determine el factor Dell general (∇).
b) ¿Cuál es el tiempo requerido a 121 °C suponiendo que el tiempo de calentamiento desde 100 °C
es de 10 min y el tiempo de enfriamiento hasta 100 °C es de 15 min? Utilice los datos de la tabla
para B stearothermophilus para un rango de temperatura de 100 °C a 130 °C.
3. Desea esterilizar sustrato para un fermentador de 5 m3 (por lotes). El sustrato está contaminado con
108 células viables/ml. El nivel de seguridad aceptado) probabilidad de contaminación es un lote
contaminado de 100.
a) Determine el factor Dell general (∇).
b) Calcular el tiempo de mantenimiento a 121 °C si el calentamiento de 100 °C a 121 °C es de 20
min y el tiempo de enfriamiento es de 15 min.
c) Se instala una unidad de filtración para filtrar el sustrato previo al llenado del fermentador. Esto
reduce el nivel de contaminación inicial a 103 células/ml. ¿Cuánto tiempo se ahorra en la
esterilización?
4. Un caldo de cultivo de Pseudomonas psicrofÍlica de 1 m3 se ha contaminado con el mesofílico
Bacillus subtilis (células vegetativas y esporas). Suponga que hay 109 células/mL de
Pseudomonas psicrofÍlica y 103 células/mL de B. subtilis (cuenta viable). Determine el tiempo de
esterilización a 121.1 ºC, suponga que la contaminación permitida es de 1 de cada 1000 lotes.
5. Un medio de fermentación contiene una concentración inicial de esporas de 8,5 x 1010. El medio se
esteriliza térmicamente a 120 °C y se anota la densidad de esporas con el paso del tiempo como
se indica a continuación:
Tiempo Densidad de a) Encuentre la tasa de muerte térmica específica.
(min) esporas (m3) b) Calcule el factor de supervivencia a los 40 min
0 8.5*1010
5 4.23*109
10 6.2*107
15 1.8*106
20 4.5*104
30 32.5
6. Los datos cinéticos de muerte térmica de Bacillus stearothermophilus (que es uno de los tipos
microbianos más resistentes al calor) son los siguientes a tres temperaturas diferentes
T ºC K (min-1) a) Calcule la energía de activación (E) y la constante de Arrhenius
(Ao) de la tasa de muerte térmica específica k.
115 0.035
b) Encuentre kd a 130⁰C
120 0.112
125 0.347
7. El valor D120 para un microorganismo es de 3.0 minutos. Si tenemos una contaminación inicial de 8
x 1012 células por gramo. ¿Qué valor de contaminación tendrá la muestra después de un tratamiento
térmico a 120ºC de 18 minutos?
8. Determinar el valor del tiempo decimal de termodestrucción a 116 ºC (D116) de un microorganismo a
partir de los siguientes datos de supervivencia al tratamiento:
Duración del Número
Tratamiento min de viables
5 340
10 65
15 19
20 4,5
25 1,3
9. Las pruebas de termorresistencia realizadas para un microorganismo contaminante de un medio de
cultivo muestran los siguientes resultados: Calcular el valor D, valor Z y la Energía de activación.
N cel
T = 115 ºC viable
0 10000
6 1360
8 700
10 380
12 185
14 97
N cel
T= 118,3 ºC viable
0 10000
2 1950
4 385
6 75
8 15
10 3
N cel
T= 121 ºC viable
0 10000
1 2450
2 600
3 150
4 57
5 10
6 3
10. Se airea un fermentador (75.000 L) durante 90 h con 22 m3 de aire/min. El aire está contaminado con
200 esporas de Bacillus subtilis/m3 y la velocidad del aire es de 0,3 m/s.
Calcule el espesor y el radio del filtro de lana de vidrio que dará una probabilidad de contaminación
de 1/1000. El diámetro de la fibra es de 16 µm. Los datos de la tabla X90 son el grosor del material
del filtro que retendrá el 90 % de las partículas en el aire.
