Cátedra de Biofísica
Facultad de Medicina – UNT
Año 2021
Membrana
Trabajo Práctico Nº 8
Ayudantes estudiantiles
Procedimiento en los Trabajos Prácticos
Planteo de Objetivos
Fundamento
Materiales y Método
Resultados
Conclusión
Importancia en la Práctica Médica
Membrana plasmática
• Estructura continua
• Representa el limite entre el medio
extracelular y el intracelular.
• Presenta receptores específicos
Proteína periférica
Proteína integral
Transporte de membrana
Transporte
de
membrana
Sin gasto de Con gasto
energía de energía
Proceso de
Difusión Difusión Difusión por Bomba de Cotransporte y
fusión de
simple facilitada poros Na/K contratransporte
membrana.
Objetivos del TP:
I. DETERMINAR el potencial de reposo en la piel aislada
del sapo.
I. DETERMINAR cualitativamente y cuantitativamente el
transporte activo de iones a través de la piel aislada del
sapo.
Fundamento Objetivo I
El potencial de reposo de la membrana celular es la diferencia de potencial que
existe entre el interior y el exterior de una célula.
Se debe a una desigual distribución de iones a ambos lados de la membrana,
comportándose ésta como una barrera selectiva.
.
Piel del sapo:
• Modelo experimental
• Se comporta como la
nefrona humana.
-60 a -90 mV
• (-) exterior, (+) interior.
Materiales y Método
• Piel aislada del sapo
• Cámara de Ussing
• Solución Ringer
• Potenciómetro
• Electrodos de plata y calomel
• Aireador
• Milivoltímetro y microamperimetro
• Batería
Materiales y Métodos
C: Electrodo de Calomel
Ag: Electrodo de plata.
CC: Cortocircuitador
Materiales y Métodos I y II
Método Objetivo I
1. Se conectan los electrodos de Calomel a un milivoltímetro.
2. Se lee directamente en el milivoltímetro el potencial de reposo.
“El potencial de reposo se debe a la
desigual distribución de cargas a
ambos lados de la membrana”
Fundamento Objetivo II
“Método de corriente de Cortocircuito o Contracorriente”
Me permite medir el transporte neto de iones Na+ a través de la membrana, lo que origina
una diferencia de potencial debido al transporte activo de dichos iones.
“CÁMARA DE
USSING”
Puede detectar y cuantificar las funciones de
transporte y barrera del tejido vivo.
Método Objetivo II
1. Se conectan los electrodos de Plata
a un cortocircuitador
2. intercalar entre ellos un
microamperímetro.
(con el se hace circular corriente
hasta anular el potencial de reposo).
1. leer en el microamperimetro la
cantidad de μÅ circulantes.
Esto llama “corriente de cortocircuito” y
equivale al transporte neto de iones Na+
por transporte activo.
Método Objetivo II
• Luego procedemos de la siguiente manera:
Llevado a 1Hs
Para trabajar con Eq.
Método Objetivo II
• Para un cm:
Método Objetivo II
• ¿Qué cantidad de iones se transportan a través de la membrana?
Lectura del microamperímetro
Conclusiones
A través del método de Ussing verificamos el potencial de reposo y el transporte
activo de iones Na+ a través de la piel aislada del sapo.
En el objetivo 1 determinamos la diferencia de potencial en la piel aislada del
sapo. Este potencial de reposo es de -60 a -90mV, siendo la cara interna
electropositiva y la cara externa electronegativa.
En el objetivo 2 determinamos que existe un transporte activo de iones Na+ a
través de la membrana. El flujo de iones se produce del lado externo al interno de
la piel del sapo y es igual a 1,6 μEq . h^(-1) 〖cm〗^2 de iones Na+.
Aplicaciones Médicas
ALTERACIONES EN LAS PROTEÍNAS DE LA MEMBRANA
• Alteraciones en las proteínas de transporte: Síndrome de Fanconi, raquitismo,
osteomalacia.
• Alteraciones en proteínas receptoras: acondroplasia
• Alteraciones en proteínas que son canales iónicos: enfermedades del sistema
nervioso como epilepsias, episodios atáxicos o Miotonías, incluyendo al músculo
cardíaco generando arritmias.
Muchas Gracias!
