Este documento describe cómo obtener valores de la curva de crecimiento microbiano mediante la estimación lineal a partir de la ecuación de la recta. Explica cómo graficar los datos de crecimiento en función logarítmica natural para obtener la ecuación de la recta y así calcular parámetros como la velocidad de crecimiento, la duración de las fases de latencia y exponencial, y el fin de la fase de crecimiento de manera más precisa que usando métodos semilogarítmicos. Proporciona un ejemplo con datos de crec
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Este documento describe cómo obtener valores de la curva de crecimiento microbiano mediante la estimación lineal a partir de la ecuación de la recta. Explica cómo graficar los datos de crecimiento en función logarítmica natural para obtener la ecuación de la recta y así calcular parámetros como la velocidad de crecimiento, la duración de las fases de latencia y exponencial, y el fin de la fase de crecimiento de manera más precisa que usando métodos semilogarítmicos. Proporciona un ejemplo con datos de crec
Este documento describe cómo obtener valores de la curva de crecimiento microbiano mediante la estimación lineal a partir de la ecuación de la recta. Explica cómo graficar los datos de crecimiento en función logarítmica natural para obtener la ecuación de la recta y así calcular parámetros como la velocidad de crecimiento, la duración de las fases de latencia y exponencial, y el fin de la fase de crecimiento de manera más precisa que usando métodos semilogarítmicos. Proporciona un ejemplo con datos de crec
Este documento describe cómo obtener valores de la curva de crecimiento microbiano mediante la estimación lineal a partir de la ecuación de la recta. Explica cómo graficar los datos de crecimiento en función logarítmica natural para obtener la ecuación de la recta y así calcular parámetros como la velocidad de crecimiento, la duración de las fases de latencia y exponencial, y el fin de la fase de crecimiento de manera más precisa que usando métodos semilogarítmicos. Proporciona un ejemplo con datos de crec
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PRÁCTICA 4
ESTIMACIONES LINEALES A PARTIR DE
LA ECUACIÓN DE LA RECTA
Etapa 1.
1. Elemento de Competencia. Establecer la importancia de la microbiología
predictiva en la industria alimentaria Identificando los parámetros involucrados en la curva de crecimiento microbiano para determinar su influencia en el producto terminado.
2. Propósito de la práctica. Obtener los valores de la curva de crecimiento
mediante la estimación lineal a partir de la ecuación de la recta.
3. Introducción
Como hemos notado, el crecimiento exponencial, sigue una tendencia
lineal. Al graficar Log y LN podemos obtener una ecuación que representa la pendiente y de la cual, podemos obtener valores más exactos de las fases del crecimiento microbiano. Al obtener la R2 podemos inferir si el crecimiento se comporta más con tendencia lineal o con tendencia exponencial. Si obtenemos la R2 en función exponencial y en función lineal, el valor más cercano a 1, nos indica el tipo de tendencia de crecimiento microbiano presente (Cabeza-Herrera E, 2011).
En anteriores ejercicios, hemos calculado los parámetros de la curva con
los valores obtenidos de acuerdo con el gráfico de la curva de crecimiento con datos semilogarítmicos en UFC/mL, mediante la utilización de formulas específicas para cada parámetro y tomando como No el primer cambio logarítmico y el Nt el último. Sin embargo, cuando graficamos la fase exponencial (con gráfico logarítmico) y obtenemos la ecuación de la recta, ésta nos proporciona datos importantes para el cálculo de diversos parámetros. Estos datos al ser matemáticos son más exactos que las estimaciones semilogarítmicas. Ahora el No
33 (Y min) es el inicio de la fase lineal y el Nt (Y max) el último punto en fase lineal. La obtención de la ecuación de la recta (y= mx + b) en donde el valor de m= (μ) o (μmax), nos da la oportunidad de calcular todos los parámetros derivados de la curva de crecimiento. De los valores obtenidos de esta ecuación, podemos obtener el valor de la velocidad específica de crecimiento (μ), la velocidad máxima de crecimiento (μmax), la duración de la fase de latencia (λ) y exponencial (α) además del fin de la fase de crecimiento (ε).
La velocidad específica de crecimiento o velocidad máxima de crecimiento
puede obtenerse directamente del valor de la pendiente del gráfico de LN ó LOG Vs tiempo (Figura 1).
25 Y max Logaritmo de la Población
20 y = 1.0988x + 3.7076 R² = 0.9975 15 LN Y min log 10 Lineal (LN) 5 Lineal (log) y = 0.4772x + 1.6102 0 R² = 0.9975 0 5 10 15 Tiempo en horas
Figura 1. Gráfico logarítmico lineal de la fase exponencial, con la ecuación
de la recta. Los datos en de crecimiento están dados en Log-UFC y Ln- UFC a partir de los datos mostrados a continuación. Los valores de Ymin y Ymax serían el primer punto y el último punto de la fase lineal respectivamente.
35 De acuerdo a los datos del ejemplo y en conjunto con las definiciones que ya hemos mencionado, tendremos los siguientes valores para “y” (en Ln):
Ymin= 7.1147 lnUFC
Ymax= 18.7660 lnUFC
Ecuación de la recta (de LN): y = 1.0988x + 3.7076
Con estos datos procedemos a determinar varios parámetros.
a) Velocidad de crecimiento (μ) que corresponde al valor de la pendiente.
μ= 1.0988 lnUFCg/h
b) Duración de la fase de latencia (λ):
λ = (ymin - b) / m
λ = (7.1147 – 3.7076)/ 1.0988
λ = 3.100 h
c) Término de la fase exponencial.
ε = (ymax - b)/ m
ε= (18.7660 – 3.7076)/ 1.0988
ε= 13.70 horas
d) duración de la fase exponencial:
α= ε – λ
α = 13.70 – 3.100
α = 10.6 h
36 4. Material para el desarrollo de la práctica.
- Computadora con programa Excel-gráficos
- Datos para realización de gráficos
5. Procedimientos para el desarrollo de la práctica.
1. De acuerdo al anexo 2 (datos de crecimiento microbiano) de la página 44
de este manual, continúe realizando las siguientes actividades. 2. Realice un gráfico logarítmico de crecimiento en logaritmo natural (LN), y obtenga la ecuación de la recta. 3. Una vez obtenidos los datos conteste lo que se solicita en el análisis de los resultados.
6. Análisis de los resultados.
Imprima los gráficos solicitados y péguelos en los espacios especificados.
a) Coloque en el siguiente espacio el gráfico logarítmico de crecimiento
microbiano (con todas sus fases) en LN.
F. estacionaria
Muerte celular Log
Lag
37 c) Obtenga un gráfico logarítmico del crecimiento exponencial señalando la ecuación de la recta (LN) y péguela en el siguiente espacio.
d) De acuerdo con los datos de la ecuación de la recta, determine la duración de
las fases de crecimiento y el valor de μ y complete la tabla, recuerde poner las unidades en aquellos valores en los que aplique.
Parámetro Valor
Ecuación de la recta (y) 4.6189x - 0.1734
Fase de latencia (λ) 1.49 h
Fase exponencial (α) 2.48 h
Fin de la fase de crecimiento (ε) 3.97 h
Valor de (μ) μ = 4.6189 Ln UFCg/h
38 Cálculos:
λ= (ymin - b) / m λ= (6.7334 - (-0.1734)) / 4.6189 λ= 6.9068 / 4.6189 λ= 1.49 h
ε= (ymax - b) / m ε= (18.2025 - (-0.1734)) / 4.6189 ε= 18.3759 / 4.6189 ε= 3.97 h
α= ε - λ α= 3.97 - 1.49 α= 2.48 h
Discusión.
Discuta sobre la técnica matemática para el cálculo de las fases, sus ventajas y desventajas sobre comparado con el método semilogarítmico. La estimación de la escala logarítmica es un método microbiológico que permite conocer __________________________________________________________________ la fase logarítmica de un microorganismo y con ella determinar el momento en el que este __________________________________________________________________ comenzará a dividirse exponencialmente. __________________________________________________________________ Una forma de identificar facilmente la fase exponencial es convirtiendo gráfica semilogarítmica en logarítmica, para ello se hace uso de la función Ln y se convierten todos __________________________________________________________________ los datos del UFC/mL para obtener la velocidad específica (μ ) (Herrera 2013). La principal __________________________________________________________________ desventaja presentada en la curva de crecimiento para determinar la fase logarítmica es que se debe de realizar anteriormente la curva de crecimiento en UFC/mL __________________________________________________________________ para determinar solo la fase. __________________________________________________________________ 39 Los cálculos realizados en la tabla 1 demuestran que es posible determinar el tiempo en el __________________________________________________________________ que la bacteria comenzó a crecer, siempre y cuando en este se tenga una medición del __________________________________________________________________ UFC/mL y así obtener la propia ecuación de la recta, lo que logró identificar el valor de μ (4.6189 Ln UFCg/h) directamente. Martínez (2016) clasifica este modelo como primario y __________________________________________________________________ menciona que su principal ventaja es evitar la perdida de exactitud de los valores, ya que este es un método sencillo. __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ Castañeda & Consuelo (2016) diferenciaron cuatro especies de bacterias del género Bacillus donde lograron demostrar que entre estas existe una diferencia al momento de __________________________________________________________________ medir su crecimiento en la curva semilogarítmica y que B. subtilis resultó presentar un mayor crecimiento en el UFC/mL. Una desventaja de los gráficos logarítmicos con los __________________________________________________________________ semilogarítmicos es que solo permiten identificar una fase dentro de toda la curva de __________________________________________________________________ crecimiento que presenta un microorganismo, debido a que con la ecuación de la recta solo es posible determinar el punto inicial y el punto final al cual esta fase se presenta. __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________
Conclusión. __________________________________________________________________ La medición de la fase logarítmica implica realizar cálculos, los cuales permiten identificar el tiempo que presenta el microorganismo en ese punto. La gráfica logarítmica es un __________________________________________________________________ método para determinar la fase, sin embargo solo se limita a un tipo de fase. El uso de la __________________________________________________________________ ecuación de la recta permite identificar la velocidad de crecimiento y mediante esta ecuación se logró obtener el tiempo que tomó al microorganismo alcanzar la fase __________________________________________________________________ logarítmica. Este tipo de determinaciones son de gran uso en la industria alimentaria, ya que permiten determinar el tiempo al cual el microorganismo fue capaz de presentar un __________________________________________________________________ cambio en su metabolismo y su crecimiento poblacional, lo que puede ser de gran uso en __________________________________________________________________ la industria de lácteos para identificar bacterias ácido lácticas.
Cuestionario.
De acuerdo a los resultados obtenidos conteste lo siguiente.
1. Si quisiera obtener el valor de kmax mediante gráfico logarítmico, ¿qué cambios
debería realizar en los gráficos obtenidos en esta Los datos de UFC/mL se deberían de convertir en Log UFC/mL práctica?__________________________________________________________
2. ¿Qué tan importante es el cálculo de λ en pruebas de vida de
Para conocer el tiempo que dura un microorganismo en dividirse anaquel?__________________________________________________________
Manual identificado en la Manual de portada con nombre y grupo, Laboratorio (5) entregado a tiempo y contestado a mano con letra legible. FORMA
El estudiante participa activamente durante la Trabajo en realización de la práctica. Se equipo (5) integra con sus compañeros de equipo.
Completos, ordenados y concisos, presentados en Resultados (30) párrafos, tablas o gráficos pegados y claramente identificados.
Discute todos los resultados
obtenidos, comparándolos con Discusiones lo reportado en literatura, (20) colocando la referencia entre FONDO
paréntesis y en el formato correcto.
Argumenta de forma adecuada,
Conclusiones de acuerdo al objetivo propuesto (20) y a los resultados obtenidos.
Cuestionario Contesta correctamente todas
(10) las preguntas
Referencias Es actual y/o especializada y
(10) además sigue el formato APA.
Total
41 8. Referencias
a) Literatura Consultada
1. Castañeda, E., & Consuelo, L. (2016). Evaluación del crecimiento de cuatro especies __________________________________________________________________ del género Bacillus sp., primer paso para entender su efecto biocontrolador sobre __________________________________________________________________ Fusarium sp. Nova, 14(26), 53-62. 2. Herrera, E. A. (2013). Aplicación de la Microbiología Predictiva para la determinación __________________________________________________________________ de la vida útil de los alimentos. Bogotá, Colombia. 3. Martínez, K. (2016). Aplicaciones de la microbiologia predictiva en la industria __________________________________________________________________ alimentaria. Facultad de Ciencias. Universidad de La Laguna. La Laguna, España. __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________
b) Citas en el texto.
Cabeza Herrera, E. (2011). Fundamentos de Microbiología Predictiva: aplicaciones
teóricas y prácticas., 103.
Lopez, A. (2008). Descripción e importancia de algunos modelos predictivos
utilizados como herramienta para la conservacion de alimentos. Temas Selectos de Ingeniería de alimentos. Pp.14-26
