Comunicaciones 

cortas

Evaluación del poder inhibitorio de extractos obtenidos 
de plantas medicinales sobre enterobacterias patógenas 
de importancia en Salud Pública
Evaluation of the inhibitory power of extracts obtained from medicinal 
plants on on pathogenic enterobacteria relevant in public health

FERNÁNDEZ MIJAIL1,2,4, SILVA PIERO1,2,4, COSTA MAGDALENA2,3      , GALLI LUCÍA2,3       , 
BRUNO ESTELA2,4,*

1.    Facultad  de  Ciencias  Farmacéuticas,  Bioquímicas  y  Biotecnológicas,  Arequipa­Arequipa, 

Perú. 2. Cátedra Microbiología Aplicada, Facultad de Ciencias Veterinarias (FCV), Universidad 
Nacional  de  La  Plata  (UNLP),  Argentina.  3.    Consejo  Nacional  de  Investigaciones  Científicas  y 
Técnicas  (CONICET),  Argentina.  4.  Centro  de  Investigación  y  Desarrollo  en  Criotecnología  de 
Alimentos (CIDCA, UNLP­CONICET­CICPBA), Argentina. 
* Correo electrónico de la autora de contacto: ebruno@fcv.unlp.edu.ar

Resumen
Los  extractos  vegetales  pueden  ser  obtenidos  de  diferentes  partes  de  las  plantas  como  hojas,  tallos,  flores  y 
raíces.  El  interés  por  los  extractos  vegetales  ha  aumentado  notablemente  por  sus  propiedades  bactericidas, 
fungicidas  y  antioxidantes.  Por  tal  motivo,  el  objetivo  del  presente  trabajo  consistió  en  evaluar  el  poder 
inhibitorio  de  sustancias  extraídas  de  cuatro  plantas  medicinales:  Schinus  molle  (molle),  Sesamum  indicum 
(sésamo)  Cinnamomum  zeylanicum  (canela)  y  Minthostachys  mollis  (muña)  frente  a  diez  bacterias 
enterobacterias patógenas. Los extractos se obtuvieron con o sin maceración empleando solventes orgánicos y 
por extracción acuosa. La metodología de extracción que presentó mayor poder inhibitorio fue la realizada con 
solventes orgánicos, mientras que las extracciones acuosas fueron las que presentaron un poder menor. En los 
ensayos  de  inhibición,  el  extracto  de  canela  fue  el  que  presentó  mayor  poder  inhibitorio  frente  a  los 
enterobacterias patógenas, mientras que la combinación de canela con sésamo (1:1) mostró un efecto sinérgico, 
potenciando la actividad antibacteriana. Además, la canela presentó actividad bactericida frente a Salmonella 
ser. typhimurium y Salmonella ser. enteritidis.

Palabras clave
Plantas medicinales, extractos vegetales, inhibición, enterobacterias patógenas

Abstract 
Vegetable  extracts  can  be  obtained  from  different  parts  of  plants  such  as  leaves,  stems,  flowers  and  roots. 
Interest  in  vegetable  extracts  has  increased  significantly  due  to  their  bactericidal,  fungicidal  and  antioxidant 
properties.  For  this  reason,  the  objective  of  this  work  was  to  evaluate  the  inhibitory  power  of  the  vegetable 
substances  extracted  from  four  medicinal  plants:  Schinus  molle  (molle),  Sesamum  indicum  (sesame) 
Cinnamomum  zeylanicum  (cinnamon)  and  Minthostachys  mollis  (muña)  against  ten  pathogenic 
enterobacteria. The extracts were obtained with or without maceration with organic solvents and by aqueous 
extraction. The extraction methodology that presented the highest inhibitory power was that carried out with 
organic  solvents,  while  the  aqueous  extractions  were  those  that  presented  lower  inhibitory  power.  In  the 
inhibition  assays,  cinnamon  extract  showed  the  greatest  inhibitory  power  against  pathogenic  enterobacteria, 
while  the  cinnamon  extract  combined  with  sesame  (1:1)  showed  a  synergistic  effect  enhancing  antibacterial 
activity.  In  addition,  cinnamon  presented  bactericidal  effect  against  Salmonella  ser.  typhimurium  and 
Salmonella ser. enteritidis.

Key words
Medicinal plants, vegetable extracts, inhibition, pathogenic enterobacteria 

Fecha de recepción: 03/05/2019 ANALECTA VET 2019; Julio­Diciembre; 39(2):27­32
Fecha de revisión: 19/07/2019 Impresa ISSN 03655 14­8 Electrónica ISSN 1514­2590
Fecha de aprobación: 26/09/2019 doi.org/10.24215/15142590e040

27
Fernández et al.

Introducción sumergieron durante 5 min en hipoclorito de sodio 
al 10 %, se filtraron, se enjuagaron con agua desti­
Los  productos  alimenticios  están  frecuen­ lada estéril y se secaron en estufa. Posteriormente 
temente  propensos  a  la  contaminación  causada  se  trituraron  (multiprocesadora  Peabody,  PE­
por  agentes  patógenos.  Con  el  fin  de  garantizar  la  MC9103, China). Para la obtención de los extractos 
seguridad  alimentaria,  existe  la  necesidad  de  acuosos, se colocaron 4 g de muestra en 36 mL de 
generar  medidas  de  control  eficaces  con  conser­ agua  destilada,  se  sometieron  a  agitación  durante 
vantes  antimicrobianos,  que  garanticen  la  inacti­ 30  min,  y  se  centrifugaron  a  6000  rpm,  a  4  ºC, 
vación bacteriana y que a su vez no generen efectos  durante  10  min  (Darré  et  al.,  2017).  Posterior­
secundarios  por  su  consumo.  Por  tal  motivo,  se  mente,  se  retiró  el  sobrenadante  y  se  reservó.  El 
están  estudiando  extractos  vegetales  con  la  finali­ pellet  resultante  de  esta  primera  extracción  se 
dad  de  demostrar  su  capacidad  antimicrobiana  resuspendió  con  18  ml  de  agua  destilada  y  se 
(García et al., 2010). Los extractos son mezclas de  procesó  repitiendo  el  procedimiento  anterior­
varias  sustancias  químicas  biosintetizadas  por  las  mente descripto. El sobrenadante obtenido de esta 
plantas  y  están  compuestos  principalmente  por  segunda  extracción  se  combinó  con  el  de  la 
terpenos y sus derivados, así como también, hidro­ primera  extracción  y  se  conservó  a  0  °C  durante 
carburos,  alcoholes,  ácidos,  ésteres,  y  aldehídos.  24  h.  La  conservación  de  este  extracto  se  realizó 
Tienen  un  amplio  campo  de  aplicación  tanto  para  liofilizando  el  sobrenadante  obtenido  en  la 
medicina  humana  como  veterinaria  (Abadie  et  al.,  primera y segunda extracción.
2014; Bozin et al., 2006; Deveci et al., 2010).   Para  la  obtención  de  los  extractos  con 
Las  características  de  las  plantas  medici­ solventes  orgánicos  se  procedió  según  la  metodo­
nales  tales  como  Sesamum  indicum  (sésamo),  logía  de  Darré  et  al.,  (2017),  agregando  36  ml  de 
Cinnamomum  zeylanicum  (canela),  Minthosta­ metanol  absoluto  o  etanol  96°  a  4  g  de  muestra. 
chys mollis (muña), Schinus molle (molle), son las  Para analizar el efecto del tiempo de extracción, un 
siguientes:  el  extracto  de  sésamo  está  compuesto  lote  de  extractos  se  utilizó  para  realizar  las 
principalmente  por  sesamina  y  sesamolina,  por  lo  determinaciones  inmediatamente,  mientras  que  el 
que  los  usos  son  alimentario,  medicinal,  antioxi­ otro  lote  se  dejó  macerar  7  días  a  0  °C  para  luego 
dante  y  bactericida  (Castro  Montoya  et  al.,  2015).  realizar  las  determinaciones.  Posteriormente,  los 
El  extracto  de  canela  está  compuesto  principal­ lotes se centrifugaron a 6000 rpm, a 4 °C, durante 
mente  por  sustancias  antioxidantes  fenólicas  y  10  min.  El  sobrenadante  fue  retirado  y  se 
polifenólicas  (Sánchez  Miranda,  2013)  y  además  concentró  por  medio  de  un  rotavapor  (Büchi  R­
contiene  cinamaldehído  como  principio  activo.  Se  124, Labortechnik A.G., Flawil, Suiza).
utiliza  en  la  industria  alimentaria  y  medicinal 
como  antibacteriano  y  antifúngico  (Wong  et  al., 
2014). El extracto de muña está compuesto princi­ 2.  Ensayos  de  inhibición  de  las  enterobac­
palmente  por  sustancias  terpénicas  y  fenilpro­ terias patógenas
pánicas. Se utiliza en la industria alimentaria como 
digestivo,  antihelmíntico,  afrodisíaco  y  antibacte­ 2.1. Método de difusión en agar por disco
riano y en la industria farmacéutica como antifún­
gico y antibacteriano (Alegre et al., 2017). El molle  Para  los  ensayos  de  inhibición  se 
está  compuesto  mayoritariamente  por  terpenos  utilizaron  10  cepas  bacterianas  de  la  colección  del 
(Arias  et  al.,  2017).  Sus  múltiples  usos  abarcan  Laboratorio  de  Seguridad  Alimentaria  pertene­
aspectos  químicos,  industriales,  médicos  y  ciente  a  la  Facultad  de  Ciencias  Veterinarias  de  la 
alimenticios.  Universidad  Nacional  de  la  Plata  (Tabla  1).  Los 
El  objetivo  del  presente  trabajo  consistió  ensayos  de  inhibición  se  realizaron  según  la 
en  evaluar  y  comparar  el  poder  inhibitorio  de  los  metodología  descripta  por  Shiva  Ramayoni 
extractos  de  plantas  medicinales:  Schinus  molle  (2007).  Brevemente,  las  cepas  se  cultivaron  en 
(molle),  Sesamum  indicum  (sésamo)  Cinnamo­ caldo  nutritivo  durante  18­24  h  a  37  ºC  y  su 
mum zeylanicum (canela) y Minthostachys mollis  densidad  óptica  fue  estandarizada  utilizando  el 
(muña)  sobre  diez  enterobacterias  patógenas  de  equipo  DEN­1B  (Biosan,  Biosystem,  Argentina) 
importancia  en  la  Salud  Pública,  algunos  con  alcanzando  un  valor  equivalente  a  108  UFC/ml. 
probada capacidad zoonótica. Cada  uno  de  los  microorganismos  se  sembró  con 
hisopos  estériles  en  placas  de  agar  nutritivo 
(Britania,  Argentina)  en  forma  de  pátina.  Los 
Materiales y métodos extractos  se  utilizaron  en  forma  individual  y 
combinados: molle, canela, muña, sésamo, molle + 
1. Obtención de extractos vegetales  sésamo,  canela  +  sésamo.  Los  extractos  acuosos 
liofilizados  se  resuspendieron  en  agua  destilada 
La  materia  prima  utilizada  para  obtener  hasta  una  concentración  del  10  %  de  cada  uno  de 
los  extractos  vegetales  se  adquirió  en  el  Mercado  los  rendimientos  obtenidos,  mientras  que  los 
Andino  de  Liniers  (Buenos  Aires,  Argentina),  en  obtenidos  con  solventes  orgánicos  se  utilizaron 
febrero  de  2018.  Las  ramas  y  hojas  de  las  plantas  puros después de la utilización del rotavapor. Para 
se  lavaron  4  veces  con  agua  potable,  se  el  ensayo  de  difusión  se  embebieron  discos  de 

ANALECTA VET 39(2), 2019 28
 Inhibición de enterobacterias  por extractos vegetales 

Tabla 1. Enterobacterias patógenas utilizadas para los ensayos de inhibición bacteriana

papel  de  filtro  (Whatman®  91,  wet  strengthened  propiedades  funcionales  de  los  extractos  varían 
qualitative,  Maidstone,  England)  de  4  mm  de  con  la  proporción  de  los  compuestos  presentes. 
diámetro a saturación, colocando no más de cuatro  Para  especias  diferentes  se  obtienen  respuestas 
discos por placa (Figura 1). Los ensayos se realiza­ diferentes  en  su  actividad  antimicrobiana  de 
ron  por  duplicado.  La  medición  del  poder  inhibi­ acuerdo  a  las  condiciones  en  las  que  se  procesan 
torio antibacteriano se determinó cualitativamente  (Peredo­Luna et al., 2009). Las muestras extraídas 
mediante  la  formación  de  halos  de  inhibición,  los  en este trabajo con solventes orgánicos, maceradas 
que  se  clasificaron  en  dos  categorías:  inhibitorio  y  concentradas  con  el  uso  del  rotavapor,  mostra­
(+) y no inhibitorio (­). ron  poder  inhibitorio,  no  así  los  extractos  etanó­
licos y metanólicos sin maceración, ni los acuosos, 
con  excepción  del  extracto  acuoso  de  canela  sobre 
2.2. Determinación de actividad bacterios­ la  cepa  de  Staphylococcus  aureus  (Tabla  2).  Este 
tática/bactericida  de  los  extractos  vege­ resultado  puede  explicarse  teniendo  en  cuenta 
tales que,  para  extraer  los  principios  activos  con 
actividad antibacteriana, el solvente debe penetrar 
Los  extractos  vegetales  y  las  cepas  que  en  y  disolverlos.  En  cambio,  los  extractos  acuosos  no 
el  ensayo  de  inhibición  por  difusión  en  agar  se  maceran,  ya  que  pueden  propiciar  la  fermenta­
presentaron  halos  de  inhibición  bacteriana,  se  ción  o  la  formación  de  mohos  (González  Villa, 
utilizaron para el ensayo de la actividad bactericida/ 2004).  Herrera  Arias  y  García­Rico  (2006) 
bacteriostática  según  Henao  Riveros  (2003).  también demostraron que los extractos acuosos de 
Brevemente,  en  un  tubo  de  ensayo  estéril  se  canela  tuvieron  un  efecto  inhibitorio  sobre  el 
colocaron  5  ml  del  extracto  puro  a  ensayar  crecimiento de la cepa de S. aureus. Sin embargo, 
(metanólico,  etanólico)  y  se  agregaron  0,5  ml  de  a  diferencia  de  los  resultados  obtenidos  por  los 
un  cultivo  puro  de  cada  enterobacteria.  El  autores  antes  mencionados,  las  cepas  de  E.  coli  y 
momento  que  se  mezcla  el  extracto  puro  con  el  Salmonella  spp.  utilizadas  en  el  presente  trabajo 
microorganismo  se  considera  como  tiempo  0  (t0).  no  fueron  sensibles  al  extracto  de  canela,  lo  que 
En  t0,  a  2,5,  5  y  10  min,  se  transfirieron  dos  estaría  indicando  que  el  poder  inhibitorio  es 
ansadas  a  tubos  con  5  ml  de  caldo  nutritivo  específico  de  variedad  de  especie,  siendo  las 
(Britania, Argentina) y luego se incubaron durante  utilizadas en este trabajo cepas autóctonas.
24 h a 37 ºC. En los tubos en los que se observó un  Los  extractos  etanólicos  presentaron 
crecimiento  microbiano  (+)  en  los  diferentes  poder inhibitorio solo frente a la cepa de S. aureus. 
tiempos,  pero  no  en  el  inicial  t0,  los  extractos  Estos  resultados  coinciden  con  los  hallados  por 
fueron  considerados  bacteriostáticos.  En  los  tubos  Burt  (2004),  siendo  los  organismos  gram[+] 
en los que no se observó desarrollo microbiano (­),  ligeramente más sensibles que los gram[­].
los extractos fueron considerados bactericidas. Los resultados más efectivos se obtuvieron 
a  partir  de  los  extractos  vegetales  obtenidos  con 
metanol.  El  molle  inhibió  el  desarrollo  de  S. 
Resultados y discusión  aureus. La canela inhibió a S. aureus, Escherichia 
coli  O157:H7,  E.  coli  productor  de  toxina  Shiga 
Los extractos de condimentos y especias se  (STEC),  E.  coli  enteropatógeno  (EPEC),  Salmone­
han estudiado desde el punto de vista funcional, si  lla ser. enteritidis y S. ser. typhimurium. La muña 
tienen  actividad  antimicrobiana,  si  actúan  como  inhibió  a  S.  aureus.  El  sésamo  no  inhibió  a 
agentes  antioxidantes  o  si  aportan  nutrientes.  Las  ninguna de los enterobacterias ensayadas. 

ANALECTA VET 39(2), 2019 29
Fernández et al.

Tabla 2. Ensayo de inhibición de los extractos vegetales sobre las enterobacterias patógenas 

A: extracción acuosa; E: extracción etanólica con maceración; M: extracción metanólica con maceración

En  la  literatura  se  registran  numerosas  demostraron  la  actividad  antibacteriana  del 
combinaciones  de  extractos  vegetales  para  poten­ extracto metanólico de la corteza de canela.
ciar  su  actividad,  como  la  canela  más  el  clavo  de 
olor  (Pastrana  Puche  et  al.,  2017).  En  el  presente 
trabajo,  la  combinación  del  sésamo  con  el  molle 
produjo  inhibición  de  S.  aureus,  mientras  que  la 
combinación  del  sésamo  con  la  canela  inhibió  el 
desarrollo de todas las cepas ensayadas. Asimismo, 
estudios  anteriores  como  los  de  Amara  et  al., 
(2008)  y  Huamán  et  al.,  (2003)  demostraron  la 
actividad antibacteriana del extracto metanólico de 
la canela (que en este trabajo fueron preparados a 
partir de la corteza).
La  evaluación  del  efecto  bacteriostático/
bactericida  puede  observarse  en  la  Tabla  3.  La 
mayoría  de  los  extractos  ensayados  presentaron 
efecto  bacteriostático  a  t0,  mientras  que  el  efecto 
bactericida solo se observó en la canela frente a S. 
ser.  typhimurium  a  5  min  y  frente  a  E.  coli 
O157:H7 a 10 min. Los extractos de molle, molle +  Figura  1.  Poder  inhibitorio  de  extractos  vegetales  sobre  el 
sésamo  y  muña  frente  a  S.  aureus  no  presentaron  Staphylococcus  aureus.    Método  de  difusión  en  agar  nutritivo 
ningún tipo de efecto. Esto puede relacionarse con  por  disco  frente  a  molle  (1),  canela  (2),  muña  (3),  sésamo  (4). 
La flecha indica los halos de inhibición. 
lo  descripto  por  diversos  investigadores  que  han 
demostrado que se requieren altas concentraciones 
de  principios  activos  de  extractos  vegetales  para 
lograr  inhibir  el  crecimiento  de  microorganismos  La  evaluación  del  efecto  bacteriostático/
patógenos (Rodríguez Pava et al., 2017). bactericida  puede  observarse  en  la  Tabla  3.  La 
En  la  literatura  se  registran  numerosas  mayoría  de  los  extractos  ensayados  presentaron 
combinaciones  de  extractos  vegetales  para  efecto  bacteriostático  a  t0,  mientras  que  el  efecto 
potenciar su actividad, como la canela más el clavo  bactericida solo se observó en la canela frente a S. 
de  olor  (Pastrana  Puche  et  al.,  2017).  En  el  ser.  typhimurium  a  5  min  y  frente  a  E.  coli 
presente trabajo, la combinación del sésamo con el  O157:H7 a 10 min. Los extractos de molle, molle + 
molle  produjo  inhibición  de  S.  aureus,  mientras  sésamo  y  muña  frente  a  S.  aureus  no  presentaron 
que  la  combinación  del  sésamo  con  la  canela  ningún tipo de efecto. Esto puede relacionarse con 
inhibió  el  desarrollo  de  todas  las  cepas  ensayadas.  lo  descripto  por  diversos  investigadores  que  han 
Asimismo,  estudios  anteriores  como  los  de  Amara  demostrado  que  se  requieren  altas  concentra­
et  al.,  (2008)  y  Huamán  et  al.,  (2003)  ciones  de  principios  activos  de  extractos  vegetales 

ANALECTA VET 39(2), 2019 30
 Inhibición de enterobacterias  por extractos vegetales 

Tabla 3. Evaluación del efecto bacteriostático/bactericida de los extractos vegetales (EV)

para  lograr  inhibir  el  crecimiento  de  microorga­ Aplicada,  perteneciente  a  la  carrera  de  Microbio­
nismos patógenos (Rodríguez Pava et al., 2017). logía  Clínica  e  Industrial,  FCV­UNLP.  El  equipa­
miento  utilizado  fue  proporcionado  por  el  Centro 
de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de 
Conclusiones Alimentos (CIDCA).

En  este  trabajo  se  pudo  observar  que  los 

extractos  con  mayor  poder  inhibitorio  sobre  Conflicto de intereses
enterobacterias  patógenas  fueron  los  obtenidos 
con  solventes  orgánicos  con  maceración,  mientras  Todos  los  autores  declaran  que  no  existe 
que  la  extracción  acuosa  no  mostró  poder  conflicto de intereses.
inhibitorio.  Los  extractos  de  sésamo  y  canela  no 
mostraron  efecto  alguno  frente  a  determinadas 
cepas,  en  cambio  estos  extractos  combinados,  Bibliografía
frente  a  las  mismas  cepas,  mostraron  actividad 
inhibitoria,  observándose  un  efecto  sinérgico.  La  Amara  AA.  El­Masry  MH,  Bogdady  HH.  2008. 
aparición  de  cepas  resistentes  a  los  antibióticos  Plant crude extracts could be the solution: extracts 
comerciales  genera  la  necesidad  de  buscar  otras  showing  antitumorigenic  activity.  Pakistan 
alternativas  para  controlarlas.  Tal  es  el  caso  del  Journal of Pharmaceutical Sciences. 21(2):159­171.
uso  de  plantas  que  contienen  principios  activos 
capaces  de  inhibir  el  crecimiento  bacteriano.  Por  Abadie  R,  Medina  R,  Ruiz  L,  Tresierra­Ayala  A. 
este  motivo,  los  resultados  obtenidos  en  el  2014.  Actividad  antibacteriana  de  extractos 
presente  trabajo  podrían  ser  tenidos  en  cuenta  vegetales frente a cepas intrahospitalarias, Iquitos­
para  futuros  usos  medicinales  contra  cepas  Perú. Revista ECIPerú. 11(1), 31­38. 
bacterianas  con  particular  interés  en  la  Salud  doi: 10.33017/RevECIPeru2014.0005
Pública.
Alegre  A,  Iannacone  J,  Carhuapoma  M.  2017. 
Toxicity of aqueous, ethanolic and hexanic extracts 
Agradecimientos of  Annona  muricata,  Minthostachys  mollis, 
Lupinus  mutabilis,  and  Chenopodium  quinoa 
El  presente  trabajo  fue  financiado  con  against  Tetranychus  urticextractos  and 
insumos    propios  de  la  cátedra  de  Microbiología  Chrysoperla  externa.  Chilean  Journal  of 

ANALECTA VET 39(2), 2019 31
Fernández et al.

Agricultural & Animal Sciences. 33(3):273­284.  Herrera  Arias  F,  García­Rico  RO.  2006. 

doi: 10.4067/s0719­389020017005000705  Evaluación  in  vitro  del  efecto  bactericida  de 
extractos acuosos de laurel, clavo, canela y tomillo 
Arias  JP,  Silva  GA,  Figueroa  IC,  Fischer  SG,  sobre cinco cepas bacterianas patógenas de origen 
Robles­Bermúdez  A,  Rodríguez­Maciel  JC,  alimentario.  Bistua:  Revista  de  la  Facultad  de 
Lagunes­Tejeda  A.  2017.  Actividad  insecticida,  Ciencias Básicas, 4(2), 13­19.
repelente  y  antialimentaria  del  polvo  y  aceite 
esencial  de  frutos  de  Schinus  molle  L.  para  el  Huamán  S,  Hurtado  H,  Kong  V,  León  C,  León  D, 
control  de  Sitophilus  zeamais  (Motschulsky).  Lister  P,  Miñano  K,  Orrego  F,  Santillán  L.  2003. 
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