EXTRACCIÓN DE PECTINAS

María Inés Durango, Orlando Nájera, María Claudia Tirado, Andrea Avilés, Anderson
Segura, Daniela Cuadrado
Facultad De Ingenierías.
Ingeniería De Alimentos.
Universidad De Córdoba.

Resumen

El presente informe se enfoca en la extracción de pectina liquida en condiciones óptimas. La

pectina es un producto tecnológicamente funcional de mucho interés en la industria de los
alimentos en el desarrollo de productos por sus propiedades reológicas que son favorables para la
elaboración de diferentes productos aportando textura y consistencia. Para la extracción de pectina
liquida se estudia el tratamiento y análisis de la cascara de maracuyá como materia prima.

1. INTRODUCCIÓN En los vegetales, la pectina se encuentra

en forma insoluble, la llamada
Actualmente la pectina se obtiene de los "protopectina", que se solubiliza durante
restos de la extracción de zumo de la maduración de las frutas y en la
manzana y, sobre todo, de los de la extracción con ácido, formando la pectina
industria de los zumos de cítricos. La soluble. En este proceso se pierden
pectina de manzana suele ser de un sobre todo las regiones ramificadas. A
color algo más oscuro, debido a las nivel experimental en el laboratorio se
reacciones de pardea miento enzimático. extrajo pectina a partir de la cáscara de
La pectina se extrae con agua caliente (plátano maracuyá pomelo y manzana) lo
acidificada, precipitando la de la cual pretende estudiar el rendimiento
disolución con etanol o con una sal de porcentual de la pectina extraída de cada
aluminio. una de las cascaras utilizadas y la
Las pectinas están formadas “calidad” o la optimización del proceso de
fundamentalmente por largas cadenas extracción que se realizó.
formadas por unidades de ácido
galacturónico, que puede encontrarse 2. OBJETIVOS
como tal ácido, con el grupo carboxilo
libre, o bien o con el carboxilo • Extraer pectinas a partir de las
esterificado por metanol (metoxilado). cáscaras de (maracuyá,
En las frutas, la mayoría de los grupos pomelo, manzana, etc.)
ácidos del ácido galacturónico están • Identificar el procedimiento
esterificados por metanol. Este metanol necesario para la extracción
puede perderse con relativa facilidad por de pectinas.
hidrólisis ácida o enzimática, dejando el • Determinar el porcentaje de
grupo ácido libre. pectina obtenido de cada
cáscara utilizada.
3. MARCO TEORICO
Las pectinas están constituidas por de ser un gelificante natural. También la
unidades de ácido D-galacturonico de podemos utilizar como aditivo
conformación 4C, unidades por enlaces estabilizante, entre otros usos no
α 1-4. Las funciones ácidas pueden estar gastronómicos. La pectina suele ser
esterificadas por metanol. El grado de extraída de la fruta por lo general, de la
metilación es variable y determina la piel de la manzana o de los cítricos.
aptitud tecnológica de las pectinas
extraídas. En las pectinas extraídas en Es utilizada para acelerar el proceso de
medio ácido, los galacturónicos están en elaboración y rebajar los porcentajes de
gran parte en forma de ésteres metílicos. azúcares. Por ejemplo, cuando
Se pueden distinguir dos clases de realizamos una mermelada o confitura es
sustancias pécticas: necesario añadir una gran cantidad de
azúcar para que éste nos funcione como
Los ácidos péctinicos, que tienen parte conservante y para que la pectina actúe
de sus ácidos galacturónicos como mejor, además, necesitamos que esté
ésteres metílicos y los ácidos pécticos, cocinando varias horas al fuego para que
que solo contienen moléculas del ácido se evapore el agua y la concentración
sin esterificación. sea mayor y así vaya actuando como
espesante la pectina. Después de un
En resumen las péctinas son largo y tedioso proceso, es posible que la
polisacáridos esencialmente ácidos que textura de la mermelada o confitura no
pueden ser extraídos por el agua, los quede con la textura deseada. Para ello,
agentes quelantes del calcio y los ácidos es muy cómodo utilizar la pectina en
diluidos, y capaces de formar geles. polvo que comercializan, ya que
Debido a esta capacidad y a sus utilizándola rebajaremos el porcentaje de
propiedades de polielectrolitos, estos azúcar, el tiempo de elaboración y
glicanos juegan un papel importante en equilibraremos nuestros porcentaje de
los mecanismos de acción de las fibras pectina necesario para cada tipo de fruta.
alimentarías. Las péctinas son extraídas
principalmente de la corteza de agrios, 4. MATERIALES
del orujo de manzanas y de la
remolacha. La hidrólisis en agua caliente • Estufa eléctrica
a PH ácido de la protopéctina, libera la • Beaker
péctina y sustancias solubles neutras • Pinzas
indeseables (proteínas, gomas, otros • Embudo
glúcidos, etc.). A pesar de que las • Espátula
proteínas están presentes en muchos • Balanza
vegetales, no cualquiera sirve para su • Erlenmeyer
producción industrial.
5. PROCEDIMIENTO
La pectina es un polisacárido que se
encuentra en las paredes celulares de
• Pesar 30 gr. de cascara de
las plantas y principalmente en sus
maracuyá introducirla en un
frutos. Tiene un amplio abanico de usos,
beaker de 600ml y adicionar
aunque su característica principal es la
agua hasta cubrirlo, someterlo
 a escaldado a 1000C durante
10 minutos.
• Dejar enfriar y luego decantar
toda el agua; introducir la fruta 7. ANALISIS DE RESULTADOS
en un erlenmeyer, adicionar Los resultados indican que las
100ml de agua y 4ml de HCL condiciones de extracción evaluadas
6N y luego condensar. afectaron el rendimiento de la pectina
• Contar 15 minutos a partir de extraída de la cáscara de maracuyá. La
la primera gota de pectina obtenida cumple con los
condensado. conceptos teóricos del comportamiento
• Colocar el contenido mediante regular de esta sustancia, dado a lugar
una tela filtrante y exprimir. una precipitación de la pectina en
Tomar 20ml de líquido péptico presencia de alcohol y por otro lado una
y agregar 20ml alcohol al solubilidad y gelificación.
96%. Filtrar el gel formado y
seguidamente pesar.

6. RESULTADO 8. CONCLUSIÓN

Las características del gel a formar

dependen esencialmente del grado de
esterificación que influye en la resistencia
de los geles, la viscosidad de las
disoluciones y la velocidad de formación
del gel.

Pueden formar geles estables con poca o

ninguna cantidad de azúcar pero
requieren de la presencia de cationes
divalentes como es calcio para formar
entre cruzamientos moleculares las
Figura 2: Extracción de pectina pectinas de bajo contenido de metoxilo
son menos sensibles a los cambios de
PH es por esto que se pueden formar
geles en el intervalo de 2.5- 6.5

Figura 1: Pectina

9. CUESTIONARIO
o Tipos de pectinas de acuerdo con el metoxilo.

Según el grado de esterificación, las pectinas se clasifican como de alto o bajo metoxilo.
Las pectinas de bajo metoxilo (LMP, Low Methoxyl Pectins) presentan esterificación
menor del 50% y ayudan en la gelificación con la sola presencia de iones calcio. Este
porcentaje significa que si la cadena de ácido galacturónico tiene por ejemplo 100 grupos
carboxilicos y solamente 40 están esterificados se dirá que es da bajo metoxilo. Algunas
veces aparecen grupos amidados en el lugar de los grupos metoxilados; Esta substitución
se acentúa en los procesos industriales de desmetilación en medio amoniacal, dando
lugar a pectinas amidadas.

Las pectinas de alto metoxilo (HMP, Hih Methoxyl Pectins) poseen grupos carboxilo
esterificados en más del 50%

En el caso de las pectinas de bajo metoxilo, el mecanismo de formación de geles es

totalmente distinto, ya que la unión entre cadenas se produce a través de iones de calcio,
que forman puentes entre las cargas negativas. La estructura es semejante a la "caja de
huevos" de lso geles de alginato, pero algo menos ordenada, dada la presencia de grupos
esterificados entre los galacturónicos sin esterificar. La concentración de calcio es
importante hasta llegar a una cierta cantidad, que depende de cada tipo concreto de
pectina, y que se conoce como "saturación de calcio". Suele estar en torno a las 500 ppm.
Por encima, una mayor cantidad de calcio no tiene efecto, o incluso en algunos casos
puede llegar a debilitar el gel. Esto no sucede en el caso de otros geles de este tipo, como
es el de alginato. Las pectinas de bajo metoxilo forman geles de consistencia máxima con
cantidades de calcio que oscilan de 20 a 100 mg de por gramo de pectina. La presencia
de azúcar reduce mucho la cantidad de calcio necesaria. Consecuentemente, a menor
cantidad de azúcar presente en el producto, es necesario utilizar pectinas de metoxilo
menor para obtener la misma consistencia

La primera condición para obtener geles de pectina de alto metoxilo es que el pH sea
bajo, Para que los grupos ácidos, minoritarios, se encuentren fundamentalmente en forma
no ionizada, y no existan repulsiones entre cargas. A pH 3,5, aproximadamente la mitad
de los grupos carboxilo del ácido galacturónico se encuentran ionizados, pero por debajo
de pH 2 el porcentaje es ya muy pequeño. Las cadenas de pectinas de alto metoxilo
pueden entonces unirse a través de interacciones hidrofóbicas de los grupos metoxilo o
mediante puentes de hidrógeno, incluidos los de los grupos ácidos no ionizados, siempre
que exista un material muy hidrófilo (azúcar)que retire el a agua. En consecuencia, las
pectinas de alto metoxilo formarán geles a pH entre 1 y 3,5, con contenidos de azúcar
entre el 55% como mínimo y el 85%.

El grado de esterificación de las pectinas de alto metoxilo influye mucho sobre sus
propiedades. En particular, a mayor grado de esterificación, mayor es la temperatura de
gelificación. Por ejemplo, una pectina con un grado de esterificación del 75% es capaz de
gelificar ya a temperaturas de 95º, y lo hace en muy pocos minutos a temperaturas por
debajo de 85ºC. Por esto se llaman "pectinas rápidas". Son, por ejemplo, las que se
utilizan en la fabricación de gominolas, que con una concentración muy elevada de
azúcar, hasta el 80% de sólidos, forman geles que pueden desmoldearse al poco tiempo.

En cambio, una pectina con un grado de esterificación del 65% no gelifica auna
temperatura de 75ºC, y tarda alrededor de media hora en hacerlo a 65ºC. Es lo que se
llama una "pectina lenta". Además, las pectinas con un grado de esterificación mayor
forman geles que son ireversibles térmicamente, mientras que los geles formados por
pectinas de grado de esterificación menor son reversibles.

Para cada tipo de pectina con un grado de metoxilación concreto existe una combinación
óptima de concentración de azúcar y pH, aunque se pueden obtener geles dentro de un
cierto rango de pH.

o Grado de esterificación

Se define como el porcentaje de grupos carboxil urónidos que se esterifican con metanol.
La determinación de este porcentaje requiere la medida del contenido de metoxil ester y
del ácido anhidro urónico (Ramírez, 1980). Permite determinar la capacidad de
gelificación de la pectina.

o Proceso de extracción industrial de pectinas

SELECCIÓN: consiste en clasificar la fruta de maracuyá, debe estar sana, libre de

magulladuras, picaduras y partes obscuras.

CORTADO: partir la fruta por la mitad para eliminar las partes no aprovechables (semillas
y jugo) y obtener solamente la cáscara, luego cortarla en partes pequeñas.

SECADO: colocar los trozos de cáscara en trozos en una estufa por una hora a 60°C,
para eliminar la humedad y evitar que se deteriore.

MOLIENDA: a la cáscara seca se la tritura en un molino para que faciliten luego la

operación.

PESADA: Primero pesar las cáscaras húmedas con el fin de determinar el peso
promedio, luego pesar las cáscaras secas y molidas para proceder al respectivo análisis.

EXTRACCIÓN DE LA PECTINA: Se realizarán dos tipos de proceso de extracción: una

como medio de extracción el ácido clorhídrico y en el otro ácido sulfúrico.
FILTRACIÓN: el extracto líquido se separa de la cáscara molida por medio de la filtración.

DECOLORACIÓN: como el extracto que se obtiene es un poco turbio, es necesario

decolorarlo.

PRECIPITACIÓN: el extracto ligeramente decolorado es precipitado mediante la adición

de alcohol, el cual rápidamente forma coágulos gelatinosos, es decir formando un gel, el
mismo que tiene una coloración cremosa.

FILTRACIÓN: el precipitado obtenido se lo lleva a filtración para poder separarlo del

alcohol.

LAVADO DEL PRECIPITADO: este lavado se lo realiza con el objeto de eliminar el ácido
clorhídrico que se encuentra impregnado en la pectina precipitada, esto se logra mediante
sucesivos lavados, con alcohol al 60%.

SECADO: una vez lavada y filtrada la pectina se procede a secarla en una estufa por una
hora a 60°C, cuando está bien seca la pesamos.

MOLIENDA: la pectina seca es finalmente pulverizada, obteniendo una coloración beige

o Grados SAG

Los grados SAG. Estos grados se definen como "el número de gramos de sacarosa que
en una solución acuosa de 65 º Brix y un valor de pH 3,2 aproximadamente, son
gelificados por un gramo de pectina, obteniéndose un gel de una consistencia
determinada".

Los grados SAG de una determinada pectina extraída de una fruta como la manzana o
cáscaras de cítricos, varían principalmente según el grado de madurez de la fruta, del
proceso de extracción y condiciones de almacenamiento de la pectina obtenida.

o Proceso de producción de mermeladas

SELECCIÓN: En esta operación se eliminan aquellas frutas en estado de podredumbre.

El fruto recolectado debe ser sometido a un proceso de selección, ya que la calidad de la
mermelada dependerá de la fruta

PESADO: Es importante para de-terminar rendimientos y calcular la cantidad delos otros

ingredientes que se añadirán posteriormente.

LAVADO: Se realiza con la finalidad de eliminar cualquier tipo de partículas extrañas,

suciedad y restos de tierra que pueda es-tar adherida a la fruta. Esta operación se puede
realizar por inmersión, agitación o aspersión. Una vez lavada la fruta se recomienda el
uso de una solución desinfectan-te. Las soluciones desinfectantes mayormente emplea-
das están compuestas de hipoclorito de sodio (lejía) en una concentración 0,05 a 0,2%. El
tiempo de inmersión en estas soluciones desinfectantes no debe ser menor a 15 minutos.
Finalmente la fruta deberá ser enjuagada con abundante agua.

PELADO: El pelado se puede hacer en forma manual, empleando cuchillos, o en forma

mecánica con máquinas. En el pelado mecánico se elimina la cáscara, el corazón de la
fruta y si se desea se corta en tajadas, siempre dependiendo del tipo de fruta.

PULPEADO: Consiste en obtener la pulpa o jugo, libres de cáscaras y pepas. Esta

operación se realiza a nivel industrial empulpeadoras. A nivel semi industrial o artesanal
se puede hacer utilizando una licuadora. Dependiendo de los gustos y preferencia de los
consumidores se puede licuar o no al fruto. Es importante que en esta parte se pese la
pulpa ya que de ello va a depender el cálculo del resto de insumos.

PRECOCCIÓN DE LA FRUTA: La fruta se cuece suavemente hasta antes de añadir el

azúcar. Este proceso de cocción es importante para romper las membranas celulares de
la fruta y extraer toda la pectina. Si fuera necesario se añade agua para evitar que se
queme el producto. La cantidad de agua a añadir de-penderá de lo jugosa que sea la
fruta, de la cantidad de fruta colocada en la olla y de la fuente de calor. Una cacerola
ancha y poco profunda, que permita una rápida evaporación, necesita más agua que otra
más pro-funda. Además cuanto más madura sea la fruta menos agua se precisa para
reblandecerla y cocerla. La fruta se calentará hasta que comience a hervir. Después se
mantendrá la ebullición a fuego lento con suavidad hasta que el producto quede reducido
a pulpa. Aquellas frutas a las que deba añadirse agua, deberán hervir hasta perder un
tercio aproximadamente de su volumen original antes de añadir el azúcar. Las frutas que
se deshacen con facilidad no precisan agua extra durante la cocción, por ejemplo: mora,
frambuesa y fresa; aunque las fresas deberán hervir a fuego lento durante 10 – 15
minutos a 85°C antes de añadir el azúcar.

COCCIÓN: La cocción de la mezcla es la operación que tiene mayor importancia sobre la

calidad de la mermelada; por lo tanto requiere de mucha destreza y práctica de parte del
operador. El tiempo de cocción depende de la variedad y textura de la materia prima. Al
respecto un tiempo de cocción corto es de gran importancia para conservar el color y
sabor natural de la fruta y una excesiva cocción pro-duce un oscurecimiento de la merme-
lada debido a la caramelización delos azúcares. La cocción puede ser realizada a presión
atmosférica en pailas abiertas o al vacío en pailas cerradas. En el proceso de cocción al
vacío se emplean pailas herméticamente cerradas que trabajan a presiones de vacío
entre 700 a740 mm Hg., el producto se concentra a temperaturas entre60 – 70°C,
conservándose mejor las características organolépticas de la fruta.

ADICIÓN DEL AZÚCAR Y ÁCIDO CÍTRICO: Una vez que el producto está en proceso de
cocción y el volumen se haya reducido en un tercio, se procede a añadir el ácido cítrico y
la mitad del azúcar en forma directa. La cantidad total de azúcar a añadir en la
formulación se calcula teniendo en cuenta la cantidad de pulpa obtenida.

PRECOCCIÓN DE LA FRUTA: La fruta se cuece suavemente hasta antes de añadir el

azúcar. Este proceso de cocción es importante para romper las membranas celulares de
la fruta y extraer toda la pectina. Si fuera necesario se añade agua para evitar que se
queme el producto. La cantidad de agua a añadir de-penderá de lo jugosa que sea la
fruta, de la cantidad de fruta colocada en la olla y de la fuente de calor. Una cacerola
ancha y poco profunda, que permita una rápida evaporación, necesita más agua que otra
más pro-funda. Además cuanto más madura sea la fruta menos agua se precisa para
reblandecerla y cocerla. La fruta se calentará hasta que comience a hervir. Después se
mantendrá la ebullición a fuego lento con suavidad hasta que el producto quede reducido
a pulpa. Aquellas frutas a las que deba añadirse agua, deberán hervir hasta perder un
tercio aproximadamente de su volumen original antes de añadir el azúcar. Las frutas que
se deshacen con facilidad no precisan agua extra durante la cocción, por ejemplo: mora,
frambuesa y fresa; aunque las fresas deberán hervir a fuego lento durante 10 – 15
minutos a 85°C antes de añadir el azúcar.

La mermelada debe removerse hasta que se haya disuelto todo el azúcar. Una vez
disuelta, la mezcla será removida lo menos posible y después será llevada hasta el punto
de ebullición rápidamente. La regla de oro para la elaboración de mermeladas consiste en
una cocción lenta antes de añadir el azúcar y muy rápida y corta posteriormente. El
tiempo de ebullición dependerá del tipo y de la cantidad de fruta, si la fruta se ha cocido
bien antes de la in-corporación del azúcar no será necesario que la merme-lada
endulzada hierva por más de 20 minutos. Si la incorporación del azúcar se realiza
demasiado pronto de forma tal que la fruta tenga que hervir demasiado tiempo, el color y
el sabor de la mermelada serán de inferior calidad.

CÁLCULO DE ÁCIDO CÍTRICO: Toda fruta tiene su acidez natural, sin embargo para la
preparación de mermeladas esta acidez debe ser regula-da. La acidez se mide a través
del pH empleando un instrumento denominado pH-metro. La mermelada debe llegar
hasta un pH de 3.5. Esto garantiza la conservación del producto. Con la finalidad de
facilitar el cálculo para la adición de ácido cítrico se emplea la tabla de la página siguiente.
Para el caso del sauco, moras y fresa; que tienen un pH de 3.5, solamente es necesario
agregar 2gr de ácido cítrico por cada kilo de pulpa.

PUNTO DE GELIFICACIÓN: Finalmente la adición de la pectina se realiza mezclándola

con el azúcar que falta añadir, evitando de esta manera la formación de grumos. Durante
esta etapa la masa debe ser removida lo menos posible. La cocción debe finalizar cuando
se haya obtenido el porcentaje de sólidos solubles deseados, comprendido en-tre 65-
68%. Para la determinación del punto final de cocción se deben tomar muestras
periódicas hasta alcanzarla concentración correcta de azúcar y de esta manera obtener
una buena gelificación. El punto final de cocción se puede determinar mediante el uso de
los siguientes métodos

ADICIÓN DEL CONSERVANTE: Una vez alcanzado el punto de gelificación, se agrega el

conservante. Este debe diluirse con una mínima cantidad de agua. Una vez que esté
totalmente disuelto, se agrega directamente a la olla. El porcentaje de conservante a
agregar no debe exceder al 0.05% del peso de la mermelada.
TRASVASE: Una vez llegado al punto final de cocción se retira la mermelada de la fuente
de calor, y se introduce una espumadera para eliminar la espuma formada en la superficie
de la mermelada. Inmediatamente después, la mermelada debe ser trasvasada a otro
recipiente con la finalidad de evitar la sobre cocción, que puede originar oscurecimiento y
cristalización de la mermelada. El trasvase permitirá enfriar ligeramente la mermelada
(hasta una temperatura no menor a los 85°C), la cual favorecerá la etapa siguiente que es
el envasado. La mermelada de fresas o cualquiera otra mermelada que se prepare con
fruta entera se dejara reposar en el recipiente hasta que comience a formarse una fina
película sobre la superficie. La mermelada será removida ligera-mente para distribuir
uniformemente los trozos de fruta. El corto periodo de reposo permite que la mermelada
vaya tomando consistencia e impide que los frutos enteros suban hasta la superficie de la
mermelada cuando se distribuyen en tarros. Este periodo de reposo resulta asimismo
esencial cuando se prepara mermelada de frutas cítricas ya que en caso contrario todos
los fragmentos de fruta tenderán a flotar en la superficie de la conserva.

ENVASADO: Se realiza en caliente a una temperatura no menor a los85°C. Esta

temperatura mejora la fluidez del producto durante el llenado y a la vez permite la
formación de un vacío adecuado dentro del envase por efecto de la con-tracción de la
mermelada una vez que ha enfriado. En este proceso se puede utilizar una jarra con pico
que permita llenar con facilidad los envases, evitando que se derrame por los bordes. En
el momento del envasado se deben verificar que los recipientes no estén rajados, ni
deformes, limpios y desinfectados. El llenado se realiza hasta el ras del envase, se coloca
inmediatamente la tapa y se procede a voltear el envase con la finalidad de esterilizar la
tapa. En esta posición permanece por espacio de 3 minutos y luego se voltea
cuidadosamente.

ENFRIADO: El producto envasado debe ser enfriado rápidamente para conservar su

calidad y asegurar la formación del vacío dentro del envase. Al enfriarse el producto,
ocurrirá la contracción de la mermelada dentro del envase, lo que viene a ser la formación
de vacío, que viene a ser el factor más importante para la conservación del producto. El
enfriado se realiza con chorros de agua fría, que a la vez nos va a permitir realizar la
limpieza exterior de los envases de algunos residuos de mermelada que se hubieran
impregnado.

ETIQUETADO: El etiquetado constituye la etapa final del proceso de elaboración de

mermeladas. En la etiqueta se debe incluir toda la información sobre el producto.

ALMACENADO: El producto debe ser almacenado en un lugar fresco, limpio y seco; con
suficiente ventilación a fin de garantizar la conservación del producto hasta el momento de
su comercialización.

o Humectación, dispersabilidad , y solubilidad de las pectinas

La disolución en agua de las pectinas en polvo tiene lugar en tres etapas: Dispersión,
hinchado y disolución.
Para la dispersión del polvo es necesaria una fuerte agitación a fin de separar bien los
gránulos de pectina e impedir la formación de grumos que serían posteriormente
insolubles.

Una vez dispersada, la pectina necesita tiempo más o menos largo (función de la
temperatura, de la concentración, de la dureza del agua, etc.) para hidratarse: es la etapa
de hinchado. Por ejemplo para una pectina HM 150 ºSAG, se dispersa en una solución al
4% en agua fría o tibia.

Finalmente cuando las moléculas han fijado una cantidad suficiente de agua, entre 15 y
25 veces su propio peso según las condiciones de trabajo, se obtiene una solución
homogénea. (1)

10. BILIOGRAFIA

[1]Torres Martinez Karla, Gómez Aldapa Carlos. Optimización de la etapa de hidrólisis

ácida en el proceso de fosfatación de almidón por extrusión para la encapsulación de
aceite esencial de naranja. 2007.

[2]UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO. [2]ALVES,A. C., et al.

Colostrum composition of Santa Ines sheep and passive transfer of immunity to lambs. En:
JOURNAL OF DAIRY SCIENCE. Jun.vol. 98, no. 6, p. 3706-3716

[3]ANDERSSEN,S. H., et al. Expressing breast milk at home for 24-h periods provides
viable samples for macronutrient analysis. En: ACTA PAEDIATRICA (OSLO, NORWAY :
1992). Jan.vol. 104, no. 1, p. 43-46

[4]GROH-WARGO,S., et al. Human Milk Analysis Using Mid-Infrared Spectroscopy. En:

NUTRITION IN CLINICAL PRACTICE : OFFICIAL PUBLICATION OF THE AMERICAN
SOCIETY FOR PARENTERAL AND ENTERAL NUTRITION. Apr.vol. 31, no. 2, p. 266-
272