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FLAGELOS
INTRODUCCIN: LA MOVILIDAD EN LAS BACTERIAS

Los procariotas capaces de moverse lo hacen por alguno de estos

sistemas:

por flagelos
por deslizamiento sobre superficies slidas
por sacudidas o contracciones (en algunos cocos Gram-negativos).

Los flagelos bacterianos tpicos son largos apndices filamentosos

extracelulares, helicoidales, responsables del desplazamiento en
medios lquidos de la mayor parte de las bacterias mviles. Aunque
empleamos la misma palabra para designar a los orgnulos
locomotores de procariotas y eucariotas, ambos son totalmente
diferentes, tanto en estructura como en mecanismo de
funcionamiento:

El filamento del flagelo bacteriano, que constituye su porcin externa

ms visible, consta generalmente de un solo tipo de protena, y en l
no se realiza ningn trabajo quimiomecnico. El mecanismo del
flagelo bacteriano es rotatorio, con un motor reversible (funciona en
los dos sentidos de giro). La energa que propulsa a este motor no es
ATP ni ninguna otra molcula con enlaces energticos, sino que deriva
directamente del gradiente de protones (fuerza protn-motriz).

OBSERVACIN

A microscopa ptica

En preparaciones en fresco, no se pueden detectar los flagelos

individuales, debido a su extrema delgadez (estn ligeramente por
debajo del lmite resolutivo del microscopio). En cambio, la
microscopa ptica de alta intensidad en campo oscuro s logra
discernir los flagelos. El microscopio de contraste de fases logra
visualizar los penachos densos de flagelos de ciertas bacterias.

Pueden estudiarse fcilmente mediante impregnacin argntica en

preparaciones previamente fijadas por procedimientos suaves que no
destruyan la estructura (alcohol-ter) y con mordientes que la
engruesan artificialmente: cido tnico, sales de Al y Cr.

A microscopa electrnica: Se suelen emplear las tcnicas

habituales de sombreado o tincin negativa con cido fosfotngstico.
 ASPECTOS MORFOLGICOS

Sobre clulas intactas, los flagelos se observan como filamentos

helicoidales largos y finos. La longitud es variable (no est
determinada de modo fijo): de 5 a 10 m, pero su anchura o dimetro
es constante y uniforme para cada especie: en Escherichia coli es de
20 nm.

El carcter helicoidal del filamento es propio e intrnseco: para cada

especie, y dadas unas condiciones ambientales determinadas (sobre
todo de pH) los parmetros de la hlice son fijos y caractersticos:

longitud de onda (p. ej., de 2-2.5 m)

amplitud o anchura de la hlice (0.4-0.6 m).

Algunas especies presentan simultnemante dos tipos de flagelos,

con dos longitudes de onda diferentes (normalmente una es la mitad
de la otra). A este fenmeno se le denomina biplicidad.

El patrn de flagelacin (es decir, el nmero y localizacin de los

flagelos) vara entre especies, y reviste inters en la determinacin
taxonmica:

un solo flagelo: bacterias monotricas. Normalmente la insercin

del flagelo (en bacterias bacilares) es polar o subpolar.
dos o ms flagelos formando un penacho, normalmente en un polo:
lofotricas. (por ejemplo, en Spirillum volutans hay ms de 80
flagelos en el penacho).
dos penachos de flagelos, uno en cada polo: bacterias anfitricas.
flagelos repartidos por toda la superficie: bacterias peritricas. (Por
ejemplo, Escherichia coli posee unos 10 flagelos, mientras que
Proteus mirabilis posee cientos, dando aspecto muy denso a la
disposicin de stos).
Ciertas bacterias presentan flagelos de insercin lateral, bien en
penachos densos (Selenomonas), bien diseminados (Pectinatus).

Existe una serie de especies Gram-negativas (Vibrio, Photobacterium,

Bdellovibrio) que poseen flagelos muy engrosados, debido a que
estn envueltos en una vaina que presenta continuidad con la
membrana externa. Por otro lado Pseudomonas rhodos tiene un
flagelo con vaina a base de subunidades de una protena.
 1.1 COMPOSICIN QUMICA Y ESTRUCTURA

Los flagelos pueden aislarse relativamente intactos por

procedimientos suaves (que desorganicen y disuelvan el PG y la
membrana citoplsmica, y en Gram-negativas, adems, la membrana
externa). La estructura del flagelo est bastante conservada entre los
procariotas, lo que apunta a que debi ser un "invento evolutivo"
relativamente temprano (aunque por lo visto, ningn eucariota lo ha
heredado).

Se observan tres partes diferenciadas: filamento helicoidal largo,

que es la nica parte visible a microscopa ptica; est conectado a
un corto segmento curvado denominado codo o gancho, que a su
vez est unido al corpsculo basal. Este corpsculo basal est
inmerso en las envueltas (membrana citoplsmica y pared), y consta
esencialmente de un cilindro que ensarta 1 o 2 parejas de anillos.

FILAMENTO

Es la parte visible en las preparaciones de clulas intactas, y

representa hasta el 95% de la masa total del flagelo. Se puede aislar
fcilmente por agitacin mecnica, con ulterior ultracentrifugacin
diferencial en gradientes de densidad.

Desde un punto de vista geomtrico se puede considerar como un

cristal unidimensional, de longitud indeterminada (en enterobacterias,
de entre 5-10 micras), pero con un dimetro uniforme de 20 nm, y
como ya vimos unos parmetros de hlice propios de cada especie.
Los flagelos silvestres en reposo suelen ser hlices levgiras, pero
como veremos enseguida, experimentan transiciones
conformacionales inducidas mecnicamente en ciertas fases del
proceso de movilidad.

Si sometemos los flagelos aislados a agentes desnaturalizantes (calor,

pH cido, urea, etc) se desintegran en subunidades de un solo tipo
de protena: la flagelina.

La flagelina:

Es una protena globular relativamente elongada, con pesos

moleculares variados, segn las especies (desde unos 15 kDa en
algunos Bacillus hasta unos 62 kDa en algunas enterobacterias).

Su composicin qumica es bastante caracterstica e inusual:

abundancia de aa. cidos y neutros; ausencia de trp y de cys; escasez

de aa. bsicos (tyr, pro, his, met).
 En condiciones fsico-qumicas adecuadas, las subunidades aisladas
de flagelina se autoensamblan espontneamente in vitro, generando
filamentos idnticos a los nativos naturales. Este ensamblaje requiere
cortos segmentos de filamentos que actan como "cebadores". Las
subunidades se van incorporando al extremo distal nativo.

Estructura tridimensional del filamento

Las subunidades de flagelina se disponen formando una matriz

cilndrica, con un empaquetamiento cuasi-hexagonal, donde se
observan 11 hileras cuasi-axiales (casi verticales) de subunidades; las
hileras cuasi-axiales se denominan fibrillas. El cilindro est hueco
(deja un canal en su interior).

Existe una ntima relacin entre esta estructura y la forma helicoidal

del filamento, lo que a su vez en esencial para la funcin propulsora
del flagelo.

Veamos pues, el fundamento de la helicidad del filamento, y de su

carcter de propulsor:

Si todas las subunidades de flagelina establecieran los mismos

enlaces con sus vecinas (o sea, si todos los enlaces fuesen
equivalentes) el filamento sera totalmente recto, y por lo tanto, no
podra actuar como propulsor. Pero la flagelina es una protena muy
notable, ya que puede cambiar reversiblemente entre dos estados
distintos (se dice que es una molcula biestable). En un mismo
filamento, cualquiera de las 11 fibrillas pueden cambiar
cooperativamente entre los dos estados. El resultado es que la
tensin que supone que algunas fibrillas estn en un estado distinto a
las dems se compensa con una deformacin del filamento en
forma de hlice macroscpica. El filamento nativo consta de 9
fibrillas normales y 2 fibrillas en transicin. Los entornos moleculares
de las subunidades de flagelina de una misma fibrilla son idnticos
entre s, pero difieren de los de las otras fibrillas: es decir, los enlaces
de distintas subunidades de fibrillas distintas son cuasi-
equivalentes (pero no totalmente equivalentes). El filamento nativo
en reposo y durante las fases de natacin es una hlice levgira con 9
fibrillas normales y 2 en transicin. Como veremos ms adelante, el
cambio del sentido de rotacin del motor flagelar induce cambios
moleculares en la longitud de onda y en la quiralidad (levo/dextrgira)
que son esenciales en el mecanismo de la natacin bacteriana. El
filamento es notablemente rgido (tanto desde el punto flexional
como torsional), de modo que durante el movimiento activo slo se
producen pequeas deformaciones, pero sin afectar a los parmetros
de la hlice. El movimiento de rotacin del motor (situado en el
corpsculo basal) se comunica al filamento helicoidal rgido, que a
modo de hlice de barco permite el avance de la bacteria.
 Antigenicidad

Tanto la flagelina nativa aislada como los filamentos intactos son

buenos antgenos, constituyendo el denominado antgeno H
flagelar, especfico para cada especie e incluso para cada estirpe o
raza.

En enterobacterias (uno de cuyos hbitats naturales es el interior de

los animales superiores) la porcin central de la flagelina es muy
variable, lo cual parece representar una respuesta evolutiva de tipo
adaptativo, que les permite enfrentarse mejor al sistema inmune de
sus hospedadores.

Las clulas flageladas reaccionan in vitro con sus antisueros

especficos, dando una aglutinacin floculenta y laxa, bastante tpica.
Esta reaccin de aglutinacin se emplea en la caracterizacin de las
variedades de Salmonella (vase la clasificacin de Kauffmann-White,
en la seccin de Taxonoma, captulo dedicado a la familia
Enterobacteriaceae).

CODO O GANCHO

Es una estructura curvada, acodada, de unos 80 nm de longitud, y

unos 22 nm de dimetro, que conecta el filamento al corpsculo
basal. Consta de unas 130 unidades de una protena elongada,
distinta de la flagelina (42 kDa), dispuestas igualmente en una matriz
cilndrica de 11 fibrillas.

El codo tambin presenta cuasi-equivalencia, responsable de la

helicidad del codo (aunque en este caso no llega a alcanzar una
vuelta completa de hlice).

Parece ser que el codo acta a modo de juntura universal o

flexible entre el filamento y el corpsculo basal.

Entre el codo y el filamento existen dos discos de protenas accesorias

del codo (HAP1 y HAP3). Cada uno de los discos consiste en dos giros
de hlice, e intervienen en el control del ensamblaje del flagelo. Son
estructuras adaptadoras que permiten la correcta interaccin entre
filamento y codo.

CORPSCULO BASAL

Es la estructura que, inmersa en la membrana citoplsmica y en la

pared celular, ancla el flagelo a la clula, y est relacionada con la
funcin del motor.

i) En Gram-negativas, la estructura tpica consta de dos pares de

 anillos coaxiales atravesados por un cilindro.

Los dos anillos exteriores se denominan L y P, y estn relacionados

respectivamente con la membrana externa y con el peptidoglucano.
Estos dos anillos estn conectados por una pared cilndrica que
enmascara la porcin del cilindro central. Los dos anillos interiores se
denominan S y M: el S est en el espacio periplsmico,
inmediatamente por encima de la membrana citoplsmica, y el M
est inmerso plenamente en dicha membrana. Conectados al
corpsculo basal se localizan varias protenas importantes para la
funcin del motor y para el sentido del giro: Por debajo del anillo M
existen tres protenas (FliG, FliM y FliN) que estn implicadas en la
conmutacin del sentido del giro del motor: permiten que el
motor pueda girar en sentido de las agujas del reloj y en el sentido
contrario al de las agujas del reloj. Recientemente se ha visto que
estas protenas configuran un quinto anillo (anillo C), por debajo del
M, ya inmerso en el citoplasma. Rodeando al corpsculo basal, a
modo de empalizada cilndrica, existen subunidades de dos protenas:
MotA y MotB. Aunque an no est aclarada totalmente su
intervencin, parece que son elementos esenciales de la maquinaria
que hace girar a una parte del corpsculo basal (motor). Este giro se
comunica probablemente al cilindro central, que a su vez debe de
estar "fusionado" con algunos de los anillos. El giro se transmite al
codo y al filamento, siendo sta la base del movimiento rotacional del
flagelo. Se supone que al menos algn anillo debe de permanecer fijo,
anclado a alguna estructura de las envueltas, actuando a modo de
estator del motor, pero se desconoce su identidad. Recientemente se
ha demostrado que los anillos interiores (M y S) se mueven
solidariamente, lo que permite descartarlos, en principio como
estatores del motor. Un buen candidato a estator podra ser el anillo
P, que podra interaccionar de modo fuerte con el PG, que es a fin y al
cabo la estructura ms rgida de las envueltas, pero este punto an
no se ha confirmado experimentalmente. Recientemente se estn
acumulando datos de que el giro se induce en el mismo anillo C
(implicacin de la protena FliG)
Una "versin modificada" de la estructura del corpsculo basal la encontramos en Caulobacter, que presenta un
anillo extra (E), y que parece que tiene que ver con la eyeccin del complejo cilindro-gancho-filamento, que se
produce en un momento determinado de su ciclo de vida. Adems, anillo L es ms ancho y el M es ms grueso.

ii) En Gram-positivas la estructura del corpsculo basal es ms

sencilla: cilindro central y una sola pareja de anillos (el M y el S).

GENTICA Y ENSAMBLAJE DEL FLAGELO

 En la "construccin" del flagelo bacteriano intervienen unas 50
protenas, entre protenas estructurales que formarn parte de la
estructura definitiva, y protenas accesorias que slo sirven durante
este ensamblaje. Debido a esta complejidad, y a que, adems,
diversas partes del flagelo deben de interaccionar con las envueltas
bacterianas (membrana, pared), no es de extraar que este
ensamblaje est bien ajustado ni que la sntesis de las diversas
"piezas" est sometida a un estricto control gentico.

ASPECTOS GENTICOS

Los alrededor de 40 genes relacionados con el flagelo y la

quiomiotaxis se organizan en unos 14 operones. En Escherichia coli y
Salmonella typhimurium los operones se expresan y regulan en un
orden jerrquico de tres niveles:

Primer nivel: slo incluye el opern flhD. Su expresin depende de

la ausencia de represin catablica (requiere CRP-AMPc). El opern
contiene slo dos genes, cuya expresin da lugar respectivamente a
FlhC y FlhD, que constituyen heterotetrmeros de dos unidades de
cada uno. Dichos tetrmeros son activadores transcripcionales de los
operones de segundo nivel.

Segundo nivel: incluye la mayor parte de los genes de protenas

estructurales del corpsculo basal, y fliA, que codifica un factor
alternativo necesario para la expresin de los operones del tercer
nivel.

Tercer nivel: incluye tres operones:

Opern fliC: codifica el filamento flagelar (flagelina)

Los operones motA y tar determinan todas las protenas de la
transduccin de la seal quimiotctica, las protenas del motor y los
receptores transmembranales.

Al menos en estas bacterias, motilidad flagelar slo se expresa

despus de la mitad de la fase exponencial. El significado adaptativo
es que no tiene sentido sintetizar un sistema tan complejo en un
medio que an es rico. En la fase post-exponencial resulta ventajoso
que las clulas se muevan en busca de nutrientes o que se alejen de
productos txicos.

ENSAMBLAJE DEL FLAGELO

A grandes rasgos, el flagelo se va ensamblando "desde dentro hacia

afuera", es decir, comenzando por el corpsculo basal y avanzando
 hacia el codo y finalmente hasta el filamento.

Por encima de los detalles relativos a la colocacin ordenada de cada

"pieza", hay dos cuestiones generales interesantes en este
ensamblado:

a) En principio, cada una de las estructuras tubulares del flagelo

(cilindro del corpsculo basal, codo y filamento) seran de longitud
indeterminada. Sin embargo, tanto el cilindro como el codo tienen, de
hecho una longitud definida, esencial para la funcionalidad de la
estructura global. Parece ser que esto se logra mediante protenas
que se adicionan a uno de sus extremos una vez que se alcanza el
tamao adecuado:

Por ejemplo, el cilindro se "recubre" en su extremo distal de una

protena (FlgD), que seala el "fin" de ese cilindro y al mismo tiempo
es la seal para que se ensamblen los siguientes componentes. El
"fin" del codo es sealado por la entrada de la protena HAP1.

De cualquier manera, se desconoce an cmo "sabe" el sistema que

se ha alcanzado la longitud adecuada del componente alargado para
adicionar el componente que "corona" y finaliza esa pieza.

b) Cmo se transportan los distintos componentes durante el

ensamblado?

Los componentes situados al nivel de la membrana (anillo M) o del

lado citoplsmico probablemente no tienen ningn mecanismo
especial.
Los componentes del motor (MotA y MotB) parece que rodean a
modo de empalizada al corpsculo basal, y se encuentran anclados
a la membrana citoplsmica a travs de sus porciones hidrofbicas.
Se insertan sin previo procesamiento (no tienen pptidos-seal).
Las protenas de los anillos externos (P y L) se sintetizan como
precursores provistos de pptidos-seal en sus extremos N-
terminales, que son rotos por el complejo de procesamiento del
pptido seal, a su paso por la membrana citoplsmica.
Las unidades de flagelina recorren la porcin central hueca del
eje del flagelo: o sea, pasan por el interior del cilindro codo
filamento, hasta llegar a la punta en crecimiento, en la que
permanentemente hay una protena (HAP2) encargada de "recibir"
las nuevas unidades al final de su "viaje" y controlar su colocacin
final sobre el filamento cebador preexistente, evitando que escapen
al medio exterior.

El filamento es una estructura de longitud indefinida, pero su tamao medio viene determinado
estadsticamente por tres variables:

tasa de sntesis de la flagelina;

 tasa de rotura espontnea de los filamentos;
tasa de insercin de los monmeros de flagelina. Esta tasa decrece
exponencialmente conforme aumenta la longitud del filamento
cebador, debido a resistencias a la difusin y a la friccin de los
monmeros conforme atraviesan el hueco axial.

1.2. MOVIMIENTO FLAGELAR

En este apartado nos vamos a plantear dos objetivos de estudio

principales:

aspectos dinmicos y funcionales del flagelo: base del movimiento;

cmo se v modificado el mecanismo flagelar bsico ante la llegada
de estmulos ambientales captados en la superficies celular.

DESCRIPCION DEL MOVIMIENTO DE UNA BACTERIA PERITRICA

Vamos a estudiar en primer lugar cmo se produce el movimiento en

bacterias peritricas como Escherichia coli o Salmonella tyiphimurium.

En ausencia de estmulos, en un medio ambiente uniforme, se

puede observar un movimiento tridimensional aleatorio, formado
por periodos de unos pocos segundos de natacin en linea recta o
ligeramente curvada (carreras o corridas), interrumpidos por
breves episodios (dcimas de segundo) de un movimiento angular
catico de la bacteria (viraje o cabeceo), tras de lo cual la clula
entra en una nueva fase de natacin en lnea aunque con una
nueva direccin.
En un gradiente espacial de un estmulo ambiental, la bacteria
responde modificando el anterior patrn. Se alteran las
probabilidades relativas de carreras y de virajes, de modo que la
bacteria prolonga estadsticamente los periodos de natacin hacia
la direccin favorable (es decir, acercndose hacia un estmulo
positivo y alejndose de uno negativo), y disminuye la frecuencia de
cabeceo. De esta manera se obtiene una locomocin aleatoria pero
estadsticamente sesgada, que propicia el avance neto en la
direccin favorable. Este movimiento se denomina taxia.
El comportamiento txico dura un tiempo limitado, que oscila de
segundos a minutos, dependiendo de la naturaleza e intensidad del
gradiente. Tras la fase de excitacin inicial y de taxia, la bacteria
se va adaptando al estmulo, de modo que regresa finalmente al
patrn aleatorio de movimiento, sin avance neto en ninguna
direccin.
 As pues, a continuacin veremos la base de estos fenmenos:

Existencia de un rotor flagelar de tipo rotacional, que es reversible.

Veremos que la bacteria tiene mecanismos para detectar un
gradiente espacial de un estmulo, y comprobaremos que este
mecanismo acta como si la bacteria estuviera detectando de
hecho un gradiente temporal.
Conectado con el sistema de deteccin de estmulos, hay un
sistema que hace que se vuelva al patrn aleatorio ante la
persistencia del estmulo (mecanismo de adaptacin).

MECANISMO DEL MOVIMIENTO ALEATORIO (EN AUSENCIA DE ESTMULO)

Resumen de lo que veremos:

El motor es rotatorio y tiene tres estados: giro en sentido contrario a

las agujas del reloj (CAR), sentido igual al de las agujas del reloj (AR)
y breves pausas.
Relacin entre estos estados del rotor y el movimiento de la clula:
"por defecto", el flagelo gira en sentido CAR, lo que provoca que los
flagelos formen un penacho detrs de la clula, que de este modo
nada en lnea recta (corrida o carrera). Pero de vez en cuando hay
breves pausas o el motor gira en sentido AR, lo que provoca un
cambio conformacional en cada filamento: ahora cada filamento
"tira" de la clula por su lado, lo que hace que la clula cabecee
(viraje).
Posibles componentes del motor y del conmutador: empalizada de
MotA y MotB alrededor del corpsculo basal. Anillo C adosado al
anillo MS posee protenas (FliG, M y N) implicadas en el cambio de
sentido (conmutador de giro).
Aspectos energticos del motor: el motor gira a altas velocidades
(unas 15.000 r.p.m), que permite que la bacteria nade a altas
velocidades relativas (unas 60 veces su longitud por segundo, lo
que a su escala sera superar la velocidad del guepardo). Este motor
usa como combustible directamente la fuerza protn-motriz (fpm),
es decir, la disipacin de parte del gradiente electroqumico de
protones a ambos lados de la membrana. El flujo es de unos 1.000
protones por cada giro. Se desconoce cmo se acopla este flujo de
protones con el movimiento del motor, pero se sabe que la
velocidad de rotacin es proporcional a la fpm.

EL MOTOR ES ROTATORIO Y TIENE 3 ESTADOS

 Desde hace varios aos, por experimentos en los que las bacterias
quedaban unidas a cubreobjetos por anclaje a ellos de los filamentos
flagelares, se dedujo que el motor flagelar funciona como una
mquina rotacional reversible, o sea, tiene dos sentidos: el de las
agujas del reloj (AR) y el contrario (CAR).

Pero desde 1989 se sabe que el motor tiene un tercer estado

intrnseco: la pausa breve, que parece deberse a ciclos ftiles de
reversin de la rotacin.

Veamos a continuacin las relaciones que se dan entre estos tres

estados funcionales del motor y los fenmenos de rotacin en lnea y
virajes bruscos.

La natacin en lnea (carrera) se debe a la rotacin continua,

durante un periodo de unos segundos, del motor, en sentido CAR.
En esta situacin, la hlice del filamento es levgira, con 9
fibrillas en conformacin normal y 2 en transicin, lo que
como ya dijimos, origina los parmetros caractersticos de la hlice.
Durante el giro, la onda helicoidal aparente viaja desde el extremo
proximal al distal. En las bacterias peritricas, las fuerzas
hidrodinmicas y mecnicas hacen que los filamentos de los
distintos flagelos se enrollen formando un haz o penacho paralelo al
eje longitudinal de la clula. En este penacho, cada flagelo gira
independientemente. El giro de los diversos filamentos helicoidales
levgiros del penacho, empuja a la clula, originando la natacin en
linea recta, con una velocidad de unos 25 micrmetros/seg.
Cuando el motor gira en sentido inverso, o sea AR, en principio
habra que esperar que la onda aparente del filamento helicoidal
viajara desde el extremo distal al proximal. Pero la situacin de
hecho es ms compleja: el giro en sentido AR del motor supone una
carga torsional dextrgira que hace que el flagelo inicie una
transicin conformacional dextrgira, desde el extremo
proximal en direccin al distal: van apareciendo ondas dextrgiras,
cuya longitud de onda es 1/2 de la longitud de onda del filamento
levgiro, lo que da un aspecto "rizado". Mientras no se complete
la transicin en toda su longitud, el filamento es de hecho
heteromrfico: el extremo proximal rizado es dextrgiro; el
extremo distal es normal, levgiro; ambas partes estn separadas
por un ngulo abrupto.
Los virajes bruscos que separan dos perodos de natacin normal
se producen precisamente porque los filamentos sufren una
transformacin incompleta desde levgiros a dextrgiros,
apareciendo como heteromrficos transitoriamente.
Los filamentos heteromrficos no forman penachos, sino que estn
separados entre s. Cada uno de ellos est tirando de un lado y
empujando por otro. Ello hace que la clula se reoriente ms o
menos al azar, y bruscamente, antes del siguiente periodo
de natacin.
 Estos virajes son, pues, en estas bacterias peritricas, un mecanismo
activo, aunque aleatorio, de reorientacin rpida.
Pero por qu una vez comenzada la transicin dextrgira, sta no
continua hasta el final, durante los periodos de rotacin AR? Segn
investigaciones recientes, la respuesta estriba en que durante las
fases de rotacin AR, ocurren breves episodios de pausa del rotor, o
bien de inversin de su sentido hacia CAR. Ello trae como
consecuencia que la hlice dextrgira, que es ms inestable, se
convierta rpidamente en hlice levgira.
Existen mutantes que son incapaces de producir pausas o
reversiones AR-->CAR durante las fases de rotacin AR. Poseen
flagelos totalmente dextrgiros que dan una natacin ms lenta y
ms oscilante que los levgiros.

COMPONENTES DEL MOTOR Y DEL CONMUTADOR

Como ya dijimos, parece que Mot A y Mot B forman parte del

mecanismo del motor. Son proteinas necesarias para la rotacin. A
microscopa electrnica aparecen rodeando a los anillos interiores (M
y S). Funcionan como unidades generadoras de fuerza, quizs
interaccionando con protenas de alguno de los anillos, para originar
la rotacin?

El sentido intrnseco ("por defecto") de rotacin del motor

flagelar es el CAR.

Esto se ha observado en "vesculas flageladas", o sea, pequeas esferas carentes de citoplasma y provistas
del orgnulo flagelar intacto.

En clulas normales, al sistema intrnseco flagelar se le superpone

otro sistema que induce peridicamente la inversin del sentido de
rotacin. Este sistema que invierte el sentido de giro se denomina
complejo conmutador, formado por tres tipos de protenas (FliG,
M, N), que parecen formar un quinto anillo (anillo C), adosado al
lado citoplsmico del anillo M-S Este complejo recibe, por una lado,
la informacin sensorial, e interacciona por otro con componentes
del motor para invertir el sentido del giro.

ASPECTOS ENERGTICOS

En condiciones normales con disponibilidad de nutrientes energticos

en el medio ambiente de la bacteria, la forma de energa que
alimenta el motor flagelar es la fuerza protn motriz (f.p.m.), es
decir, el potencial electroqumico de protones (y en las bacterias
alcalfilas, la fuerza motriz de los iones Na+).

Como el alumno seguramente conocer por la asignatura de bioqumica, y como

repasaremos en un captulo posterior, este gradiente se crea durante los procesos de
transporte de ee- en las cadenas transportadoras situadas en la membrana, o en el caso de
la glucolisis anaerobia, por la ATPsa ligada a protones, funcionando en el sentido
hidroltico (ATP-hidrolasa).

Segn esto, si se llegara a disipar la f.p.m., bien fuera porque la bacteria careciera de
suministro externo, bien fuera porque una mutacin desacopladora le impidiera
aprovechar la fuente de energa externa, el motor se quedara sin "carburante". Pero esto
no ocurre en la realidad, porque en esta situacin se pone en marcha un segundo
sistema de emergencia que transfiere protones directamente al motor. Parece que
existe una mayor concentracin de cadenas transportadoras de electrones y ATP-asas de
membrana cerca de los corpsculos basales que en otras zonas de la membrana, lo que
puede ser indicio de que el motor recibe protones de forma directa en ausencia de f.p.m.

El significado adaptativo del segundo sistema es el de servir como mecanismo de

apoyo energtico al motor cuando la f.p.m. cae por debajo de un cierto umbral, lo que
hace que siga funcionando para permitir a la bacteria alejarse de ese entorno pobre en
energa.

La manera en que se acopla el flujo de protones al motor con la

rotacin de ste es un punto bastante oscuro y desconocido. He aqu
un par de preguntas an sin respuesta:

Existe un nmero fijo de H+ requerido para cada revolucin del

motor, o el acoplamiento es laxo y depende de la carga torsional y
de la velocidad?
Qu tipo de mquina es el motor? Algunos han propuesto que es
de tipo pulsante, es decir que funcionara por pasos o saltos
cuantizados.

VARIANTES DEL MOVIMIENTO EN OTRAS BACTERIAS

Para terminar este subapartado sobre mecanismos bsicos de

movilidad flagelar, haremos referencia a algunas variantes que se
encuentran en diversos tipos bacterianos.

En bacterias uniflageladas, los dos estados rotacionales del motor

se traducen en movimiento de avance y de retroceso,
respectivamente, en lnea recta. Las breves pausas sirven como
mecanismo pasivo para reorientar la direccin aleatoriamente.

Existen bacterias que alternan simplemente entre rotacin y pausas,

de modo que durante estas ltimas el movimiento browniano sirve
para reorientar aleatoriamente a la clula (en Rhodobacter
sphaeroides, que tiene un flagelo subpolar, y en Rhizobium meliloti,
que es peritrica)

Un caso especial lo constituyen los espirilos, bacterias provistas de

penachos polares (Ej: Rhodospirillum, Thiospirillum, Spirillum): Los
flagelos de estas bacterias tienen muy poca helicidad, incluso inferior
a una longitud de onda, pero en cambio los cuerpos celulares son
helicoidales. Los flagelos forman apretados penachos polares en
forma de cono, que ejercen una fuerza torsional sobre la
clula espiral, lo que se traduce en un movimiento de avance
a modo de sacacorchos. Nunca efectan virajes. En Spirillum, los
dos penachos polares estn totalmente coordinados. La
movilidad es reversible y simtrica (movimiento adelante-atrs, por
inversin coordinada del sentido de rotacion de los penachos).

1.3. LAS TAXIAS

DEFINICIONES

En ausencia de un gradiente de estmulo, el movimiento de

cada clula es a base de perodos de 2-4 segs de natacin
separados por virajes. El movimiento en un gradiente de
estmulo se logra variando la frecuencia de virajes: si la
concentracin de un atrayente aumenta, o la de un repelente
disminuye, las clulas no viran tan frecuentemente como lo
haran en un entorno uniforme. Por lo tanto, el resultado es
que nadan en la direccin favorable ms tiempo, y este sesgo
respecto de la natacin aleatoria hace que exista un
movimiento neto en relacin con el gradiente.

Este mecanismo no es una taxia en sentido estricto (se le

puede llama clinocinesis, aunque este trmino apenas se
emplea); es un 50% menos efectivo que una taxia autntica,
pero probablemente requiere mucha menos inversin en
maquinaria sensorial y motora.

TIPOS DE TAXIAS
Se distinguen principalmente aerotaxia, fototaxia y
quimiotaxia.

1) aerotaxia: respuesta de migracin ante un gradiente de

oxgeno molecular.

Bacterias anaerobias aerotaxia negativa.

Bacterias microaerfilas atradas a tensiones ptimas de O2
(menores que la atmosfrica).

Todas las bacterias aerobias y anaerobias facultativas

aerotaxia positiva.

La aerotaxia positiva, al menos en enterobacterias, y en

bacterias purpreas en crecimiento heterotrfico, tiene un
mecanismo diferente del mecanismo txico hacia otros
atrayentes qumicos: no existe en realidad un receptor
especfico del oxgeno. La seal estimulatoria consiste en la
utilizacin del oxgeno como aceptor final de electrones en las
cadenas transportadoras respiratorias. Esto provoca una
alteracin de la f.p.m., que de alguna manera provoca un
cambio que aumenta la probabilidad de giro del rotor en
sentido CAR.

Un mecanismo similar es el que subyace a la quimiotaxia

hacia aceptores alternativos de electrones, como el fumarato
y el nitrato.

2) Las fototaxias de las bacterias fotosintticas anxicas

dependen de un mecanismo similar: detectan un gradiente de
intensidad de luz, no mediante un receptor especial, sino por
medio del transporte de electrones fotosinttico, que a su vez
provoca un cambio en el gradiente electroqumico de H+. Este
cambio afecta al motor flagelar. Se desconoce si estos
cambios son transmitidos directamente al flagelo o si existe
mediacin de proteinas "repetidoras" de la seal.

3) Las quimiotaxias, especialmente las de Enterobacterias,

son las taxias mejor estudiadas.

ESTUDIO EN DETALLE DE LA QUIMIOTAXIA

En la quimiotaxia estn implicados una serie de receptores

especficos de superficie, que recogen la seal qumica (o sea,
el quimioefector) y que inician un proceso de transduccin
intracelular de esta seal que finalmente llega al complejo
conmutador del corpsculo basal flagelar.
En estas enterobacterias los atrayentes orgnicos ms potentes son sustancias que
ocupan una situacin central en el metabolismo (ciertos aminocidos, azcares,
oligopptidos y cidos carboxlicos). Ahora bien, no existe una correlacin entre el
metabolismo de una sustancia y su capacidad como quimioatrayente.

El sistema sensorial de la bacteria, ante un gradiente espacial

de atrayente o repelente, origina una migracin neta
(acercamiento o alejamiento, respectivamente) haciendo que
la duracin de una carrera en la direccin favorable sea
mayor, y para ello influye sobre el conmutador flagelar binario
que determina el sentido de rotacin.

La bacteria capta ese gradiente espacial, detectndolo de

hecho como si fuera un gradiente temporal autogenerado por
ella misma mientras va movindose. Como veremos, la
bacteria compara, mediante el mismo receptor de membrana
que capt el estmulo, la concentracin actual de la sustancia
con la que tena en los segundos anteriores.

Adems, la bacteria vuelve al patrn aleatorio de movimiento

tras varios segundos o minutos del contacto inicial con el
gradiente: existe un mecanismo de adaptacin al estmulo
que, como veremos, implica una modificacin covalente de los
receptores.

Estos son los aspectos que vamos a pasar a considerar a

continuacin.

Estmulos qumicos. Elementos de recepcin y transduccin de las seales

qumicas

En enterobacterias existen tres tipos de estmulos qumicos

segn el tipo de receptores que los detectan.

un conjunto de azcares que son detectados por el mismo sistema

de transporte por traslocacin de grupos (PTS) que los introduce en
forma modificada al interior (repasar el tema 7); parece ser que el
nivel de fosforilacin de la enzima-II especfica (por ej., la E-IIGlc)
constituye la seal para controlar el conmutador flagelar en el caso
de la atraccin hacia cada azcar.
una serie de atrayentes orgnicos y de repelentes orgnicos e
inorgnicos que son captados directamente por protenas integrales
de membrana citoplsmica, y que funcionan exclusivamente como
receptores sensoriales;
quimioatrayentes orgnicos que se unen primero a protenas
especficas del espacio periplsmico (PBP), que son las mismas
protenas periplsmicas implicadas en el transporte de estas
 sustancias sensible al choque osmtico (repasar el apartado
correspondiente del tema 7). El complejo PBP-atrayente se puede
unir al receptor especfico de membrana de tipo similar al citado en
el prrafo anterior. Por lo tanto, este sistema se puede considerar
como una variante del anterior, en la que hay una "estacin"
intermedia de "recogida" del estmulo por parte de la
correspondiente protena periplsmica de transporte.

Estos dos ltimos tipos de estmulos usan los receptores

llamados MCP, es decir, protenas quimiotcticas aceptoras de
metilos:

Transmiten informacin desde el periplasma al citoplasma. Se

han estudiado 4 protenas MCP homlogas que atraviesan la
membrana, Actan como receptores y transductores, al unirse
directamente a algunos aminocidos y repelentes, y con
protenas de unin periplsmicas que se ligan a ciertos
azcares y dipptidos (estas protenas de unin sirven
simultneamente como parte de los sistemas de transporte
sensibles a choque osmtico).

Receptor de Aminocidos Azcares Repelentes

tipo MCP atrayentes atrayentes (1)

Tsr Ser Acetato,

leucina,
Ala benzoato, indol

Gly

Tar Asp Maltosa Cobalto, nquel

Glu

Trg Galactosa,
ribosa

Tap Dipptidos
 (1) Los azcares no se unen directamente al MCP, sino que lo hace el
complejo formado por el azcar y su correspondiente protena de unin
periplsmica.

Ejemplos:

la maltosa se une a la protena periplsmica de unin a la maltosa

(MBP), que a su vez se une al receptor Tar (el mismo que recoge
directamente asprtico y glutmico);
la galactosa se une a su protena periplsmica (GBP), y a su vez el
conjunto galactosa-GRP se une a un receptor de membrana
citoplsmica llamado Trg.

Las proteinas receptoras de membrana citoplsmica que

acabamos de citar son constitutivas, y funcionan
exclusivamente en la recepcin y transduccin de estmulos
qumicos (a diferencia de las periplsmicas, que son
inducibles y no son exclusivas de la quimiotaxis, sino que
tambin estn relacionadas con el transporte).

Organizacin molecular de un receptor de membrana:

Los receptores de membrana que hemos visto hasta ahora

son proteinas de unos 60 kDa, bastante similares entre s en
sus secuencias, sobre todo en sus extremos C-terminales, y
muestran una estructura terciara comn:

segmento N terminal corto, citoplsmico

regin ascendente en -hlice, atravesando la membrana
dominio periplsmico, que contiene los sitios de unin para los
efectores qumicos
otra regin en -hlice, descendente, atravesando la membrana
citoplsmica
dominio citoplsmico C-terminal, con dos zonas funcionales:

regin transductora: genera la seal excitatoria hacia el motor flagelar;

regin metilable, que como veremos enseguida, funciona en la adaptacin al estmulo.

Por ello estas proteinas se denominan MCP (iniciales inglesas de "quimiotcticas
aceptoras de metilo"). Los aminocidos metilables son de 4 a 6 glutmicos
determinados (dependiendo del MCP concreto).

Protenas implicadas en la ruta de transduccin intracelular de la seal

Todos los tipos de receptores (sean MCPs o no) transmiten
informacin al flagelo por medio de al menos parte de una
cascada de fosforilacin que implica 6 protenas: CheA, CheW,
CheY, CheZ, CheR y CheB.

CheA. Es una protenquinasa que se autofosforila en una His

concreta (His-48) del dominio amino-terminal. Es el regulador
central del sistema quimiotctico:

Modula el conmutador flagelar a travs de CheY (el CheY-P origina

ms giro en sentido AR)
Retroalimenta el nivel de sealizacin de las MCP, a travs de CheB
(la CheB-P elimina metilos del MCP).

CheW. CheW es necesario para el acoplamiento entre CheA y

el MCP. Se forman complejos funcionales {MCPCheWdmero
de CheA}.

CheY. Es una pequea protena globular con 5 lminas

intercaladas con 5 hlices . Se fosforila en el Asp-57. CheY es
fosforilado por CheA, y en su forma CheY-P interacciona con el
conmutador. La interaccin entre CheY-P y el conmutador
flagelar (sobre todo con FliM) parece que incrementa la
probabilidad de una inversin del giro desde CAR a AR, con lo
que aumenta la probabilidad de virajes.

CheZ. CheZ contrarresta la seal de viraje al facilitar la

conversin de CheY-P en CheY (sin fosforilar). No se sabe si
CheZ acta como una desfosfatasa o simplemente estimula la
intrnseca (aunque lenta) capacidad de CheY de
desfosforilarse. CheZ es un dmero que al interaccionar con
CheY-P se oligomeriza. Al parecer, esa oligomerizacin regula
la actividad "fosfatasa" de CheZ.

La adaptacin: CheR, CheB y la metilacin de la MCP: La

memoria celular para que la bacteria detecte gradientes de
concentracin en funcin del tiempo es el resultado de la
metilacin de las MCPs por la CheR, y de su desmetilacin por
CheB-P.

Dependiendo del receptor, la MCP puede metilarse en 4-6

sitios, que son siempre ciertos glutmicos (Glu) conservados,
presentes en el dominio citoplsmico. La metiltransferasa
CheR metila transfiriendo grupos metilo desde la S-
adenosilmetionina (SAM) a dichos glutmicos especficos.

En ausencia de estmulo, hay un nivel basal de metilacin,

pero la unin de estmulo qumico al dominio periplsmico del
MCP provoca algn cambio conformacional en el citoplsmico,
que hace que esos sitios sean ms o menos accesibles a la
metilacin:

Si se une atrayente ms accesible a metilacin

Si se une repelente menos accesible a metilacin.

La adaptacin ocurre (al parecer) porque la metilacin

creciente disminuye progresivamente la capacidad del MCP
unido al atrayente de suministrar la seal, de modo que el
MCP regresa al estado anterior al estmulo.

CheB-P es una metilesterasa que ajusta el estado sealizador

del MCP eliminando grupos metilo, que pasan a metanol.
CheB se fosforila por CheA, y la forma fosforilada parece ser
la responsable de la mayor actividad metilesterasa. El sitio de
fosforilacin reside en el dominio amino terminal, que
presenta homologa con CheY.

El ciclo de excitacin-adaptacin

Qu es lo que ocurre cuando cada quimioefector se une a su

receptor correspondiente? Cmo se transmite la seal hasta
el motor flagelar? Esto es lo que vamos a tratar a
continuacin.

Cuando se coloca a una bacteria en un gradiente de atrayente

se observa a lo largo del tiempo una respuesta con 3 fases
distintas:

fase de latencia (que dura unos 0.2 seg.), en la que el patrn de

rotacin no se modifica.
rpida excitacin (medida aqu como la probabilidad de encontrar al
rotor girando en sentido CAR).
fase de adaptacin lenta, hasta que se restablece el patrn inicial.

Cmo se puede explicar esto? Veamos una hiptesis:

1. MCP sin estmulo: tiene una media de 1

metilo/molcula (nivel basal). En esta situacin, la CheA
tiene un nivel basal de fosforilacin, que sirve para
fosforilar a CheY y aCheB. El motor flagelar presenta un
patrn de giro de unos cuantos segundos en sentido CAR
( natacin en lnea recta), y breves perodos de sentido
AR ( virajes). Ahora veremos cmo este flujo basal de
informacin hacia el flagelo y de metilacin del MCP se
altera con un estmulo qumico. Veamos lo que ocurre
con una sustancia atrayente.

2. adicin del atrayente: fase de transduccin

intramolecular de la seal: el atrayente provoca un
 cambio conformacional en el dominio periplsmico, que
se transmite por medio de la regin transmembranal
hasta el dominio citoplsmico, que a su vez cambia
tambin de conformacin. Este cambio del dominio
citoplsmico supone de hecho una modificacin de la
regin efectora de este dominio que transmite la seal
hacia el motor flagelar. El tiempo que tarda en llegar al
motor explica el periodo de latencia.

Durante esta fase el nivel de metilacin no se altera,

pero el cambio conformacional deja "activados" a los
glutmicos metilables.

3. Transduccin intracelular de la seal: el cambio

conformacional del dominio citoplsmico tiene el efecto
de inhibir la activacin de la CheA, de modo que
desciende el nivel basal de su autofosforilacin, lo que
se traduce en que se fosforilan menos molculas de
CheY y de CheB. Al haber menos CheY-P, llegan menos
seales al conmutador flagelar de que cambie a sentido
igual al de las agujas del reloj. Por lo tanto, se prolongan
los perodos de natacin en lnea recta (y es ms
probable que la bacteria se acerque al estmulo
qumico).

4. Mientras tanto, ha estado actuando la metiltransferasa

(CheR), que ha ido aadiendo metilos a los glutmicos
del dominio citoplsmico de la MCP. Si pasa un cierto
tiempo y el dominio periplsmico sigue ocupado por el
quimioatrayente, se alcanza un gran nivel de metilacin
en ese dominio citoplsmico. Esto hace que el dominio
efector citoplsmico vuelva a una configuracin "nula", o
sea, deja de emitirse seal excitadora. A ello colabora
igualmente que el nivel de metilesterasa (la protena
CheB-P, es decir la forma fosforilada) sea bajo. Esta es la
explicacin molecular de por qu ocurre al cabo de unos
segundos la adaptacin lenta al estmulo.

Como la metilacin es relativamente lenta, esto significa que si en un determinado

momento la concentracin actual de quimioefector (detectada por el grado de ocupacin
del dominio periplsmico) es similar a la concentracin unos segundos antes
(manifestada por el nivel de metilacin del dominio citoplsmico), la bacteria "sabe"
que lleva ya un cierto tiempo acercndose al estmulo. Si la metilacin se ha
estabilizado a un nivel alto, se produce un cambio conformacional por el que el MCP
deja de emitir seal (estado nulo), y la bacteria se ha adaptado al estmulo.

Como ejercicio, veamos qu pasara si ponemos un repelente: la unin del repelente al

MCP provoca un cambio conformacional que hace que el dominio citoplsmico
interaccione ahora con el complejo CheWCheA de modo que se aumenta la tasa de
autofosforilacin de CheA. Ahora esta CheA fosforila tanto a CheY como a CheB. La
CheY-P difunde a la base del flagelo e interacciona con el conmutador (sobre todo con
FliM y FliG), y "da la orden" de que se cambie ms a menudo a giro en sentido de las
agujas del reloj (AR), lo que hace que la bacteria vire caticamente ms a menudo. Con
ello aumentan sus probabilidades de que encuentre una direccin de natacin ms
favorable (en sentido opuesto al gradiente), en cuyo caso tendramos un patrn similar a
cuando se une un atrayente. Mientras tanto, la CheR ha encontrado ms difcil acceder a
los glutmicos, y el mayor nivel de la metilesterasa (CheB-P) hace que se eliminen
metilos.

RECAPITULEMOS:

1. Aadimos un atrayente unin a MCP cambio

conformacional que provoca una inhibicin del nivel
basal de fosforilacin de CheA rotacin CAR
natacin en lnea recta durante mayor tiempo.

2. Simultneamente el MCP estimulado expone sus

resduos de glutmico. Si el estmulo contina durante
un tiempo (durante el que la bacteria sigue nadando),
aparece la regulacin especfica de ese receptor por la
metiltransferasa gradualmente se van aadiendo
metilos que hacen que deje de producirse seal
excitatoria (adaptacin lenta).

3. Pero adems, baja la tasa de metil-esterasa, lo que

colabora a esta adaptacin (debido a que deja de
fosforilarse la CheB). La bacteria est preparada para
recibir un estmulo distinto, superior.

1.4. BACTERIAS FLAGELADAS "DISPERSIVAS" ("SWARMERS")

Determinadas bacterias (las Gram-negativas del gnero

Proteus, ciertas especies de Vibrio, Serratia, algunas Gram-
positivas de los gns. Clostridium y Bacillus) tienen la
capacidad de extenderse rpidamente sobre superficies
slidas hmedas, a base de oleadas peridicas. Este
fenmeno se denomina dispersin ("swarming", en ingls), y
en placa de agar se manifiesta por la invasin de toda la
superficie a partir del foco de inoculacin.
La base de este fenmeno se ha estudiado sobre todo en
Proteus mirabilis y en Vibrio parahaemolyticus. Nos
referiremos a esta ltima bacteria:

En medio lquido, V. parahaemolyticus es un bacilo provisto de

un flagelo polar recubierto por una vaina que consiste en una
prolongacin de la membrana externa. Este tipo de clula se
denomina nadadora, y su sistema de natacin por ese flagelo
envainado se denomina Fla.

Cuando se pasa a una superficie hmeda, ocurre un fenmeno

de diferenciacin: se detiene la divisin celular, aunque la
bacteria sigue creciendo la bacteria se convierte en un
largo filamento, y al mismo tiempo se producen numerosos
flagelos laterales, no envainados, que se agregan formando
haces. Este segundo sistema flagelar se denomina Laf, y es
totalmente distinto al Fla:

los flagelos carecen de vaina;

todos sus componentes estructurales (filamento, corpsculo basal,
etc) son distintos a los del sistema Fla.

Este tipo de clulas de flagelacin mixta (flagelo polar

envainado + flagelos laterales) son las clulas dispersivas,
que estn adapatadas a colonizar rpidamente superficies
slidas o semislidas hmedas. Ambos tipos de clulas
comparten, sin embargo, el mismo sistema intracelular de
transduccin de estmulos ambientales (protenas Che de la
quimiotaxis). )Cmo se produce la transicin desde una clula
nadadora a la fase dispersiva? Parece ser que existe un nexo
de regulacin entre el flagelo polar y la expresin inducible de
los genes codificadores del sistema de flagelos laterales:

Cuando una clula nadadora llega a un medio de alta

viscosidad (por ejemplo, la superficie de un epitelio de un
animal), el flagelo polar acta como un sensor tctil, a modo
de dinammetro, registrando la informacin sobre esa
densidad. La seal se deriva de la resistencia que encuentra
este flagelo a rotar en ese entorno de mayor densidad y
viscosidad. Ello provoca una transduccin intracelular de esa
seal ambiental (por un mecanismo an desconocido) que
"desbloquea" la transcripcin de los operones del sistema Laf
(que hasta entonces estaban "silenciosos").

Pero adems, se requiere una segunda seal para esta

desrepresin: esta seal es que simultneamente, en ese
medio viscoso debe de haber bajas concentraciones de hierro.
Esto tienen un gran significado adaptativo relacionado con el
modo de vida de esta bacteria: para que la bacteria se
embarque en un proceso "caro" y complejo como la
produccin de esos flagelos, tiene que tener la "seguridad" de
que ha llegado a un hbitat apropiado (un tejido animal). La
bacteria deduce eso por dos seales simultneas: el medio es
ms viscoso y adems, hay carencia de Fe (el interior de los
vertebrados carece de Fe libre). La deteccin simultnea de
estos dos buenos indicios desreprime la produccin del
sistema Laf, que permite que esta bacteria colonice
rpidamente el epitelio, su "nicho ecolgico" al que se
encuentra adaptada evolutivamente.

1.5. FLAGELOS PERIPLSMICOS

Son un tipo de flagelos que presenta exclusivamente el grupo

de las Espiroquetas. Estas bacterias Gram-negativas son
extremadamente finas y de forma helicoidal. Estn
compuestas de:

cilindro protoplasmtico, formado por el protoplasto rodeado de

la capa de peptidoglucano. El sculo de murena de este PG tiene
forma helicoidal, y es responsable de la tpica morfologa de estas
bacterias;
membrana externa;
entre el cilindro protoplasmtico y la membrana externa se
encuentran los peculiares flagelos, insertados subpolarmente y
enrollados alrededor del cilindro. Estos flagelos se denominan
flagelos periplsmicos (= endoflagelos = fibrillas axiales).

Estructura

Cada flagelo, en s mismo, es similar al tipo de flagelo clsico

ya estudiado:

corpsculo basal, con dos pares de anillos (excepto en Leptospira,

con slo un par);
codo
filamento, a base de subunidades de flagelina.

Ahora bien, lo caracterstico es la disposicin de los flagelos

que salen de cerca de cada extremo, en relacin con el cuerpo
celular:

En la mayora de las especies, cada flagelo se extiende a lo largo

del eje bacteriano, paralelo a la superficie del cilindro
protoplasmtico, hasta alcanzar los 2/3 de la longitud total; esto
se traduce en que los flagelos que salen de cada extremo se
solapan en la zona central (la excepcin la tenemos en el gn.
Leptospira, en que no se solapan).
 Las distintas fibrillas provenientes de cada extremo discurren
paralelas y cercanas. El conjunto de estas fibrillas se manifiesta
como filamento axial, recubierto por membrana externa.

Papel de los endoflagelos en la movilidad de las espiroquetas

Los flagelos de estas bacterias, paralelos al eje longitudinal

de la clula, estn anclados al cilindro protoplasmtico, que
es rgido (mientras que la membrana externa es flexible). Al
girar los flagelos de los dos extremos en el mismo sentido,
obligan a girar al cilindro rgido en un sentido, y a la
membrana externa en sentidos contrarios. El efecto es que el
cilindro protoplasmtico gira en torno del filamento axial
formado por los flagelos periplsmicos. Esta es la base de los
distintos tipos de movimientos que podemos observar en
estas bacterias:

En medios lquidos se mueven

por avance muy rpido a modo de torniquete (el cuerpo bacteriano

se comporta como un sacacorchos)
se pueden ver tambin contorsiones, "latigazos", etc.

Sobre la superficie de medios slidos:

por rodamiento de la hlice. Esto se debe a que el filamento axial

confiere movimiento de rotacin a la membrana externa, lo que se
traduce en que la bacteria pueda rodar. (Tome el alumno un muelle,
depostelo sobre una mesa y dle un empujn).
Flexiones. Se provocan ondas propagables del cilindro. La bacteria
puede avanzar a modo de las larvas de las mariposas gemetras

Todos estos tipos de movimiento son adaptaciones

evolutivamente conseguidas que permiten el rpido avance
en medios de alta densidad (fangos espesos, mucosas de los
animales, etc), medios donde los flagelos tpicos ya no
pueden servir adecuadamente. La evolucin ha hecho que las
espiroquetas se adapten, por su peculiar estructura y la de
sus flagelos, a medios muy viscosos: de hecho, se mueven con
mayor rapidez a 300-500 cP que a 10-50 cP. Presentan,
adems taxias positivas hacia esos medios viscosos.

2. FIMBRIAS O PELOS (= PILI)

Son apndices filamentosos rectos y rgidos, ms cortos y
ms finos (3-10 nm de dimetro) que los flagelos, y que
aparecen en muchas bacterias (sobre todo Gram-negativas).
La mayora estn compuestos por un solo tipo de protena (la
pilina), de unos 17-25 kDa, cuyas subunidades se disponen en
una matriz helicoidal que deja un pequeo hueco central.

Estn implantados a nivel de membrana citoplsmica.

Nmero variable: desde 1 a varios cientos o miles por clula.

Disposicin: alrededor de todo el permetro celular, y a veces,

de insercin polar.

Aislamiento: por simple agitacin mecnica de las clulas,

seguido de ultracentrifugacin.

Composicin: ensamblaje de subunidades de pilina, protena

globular muy hidrfoba.

Ensamblaje: insercin de subunidades de pilina en la base del

pelo en crecimiento, a partir de pre-pilina, que se procesa por
escisin del correspondiente pptido-lder a su paso por la
membrana citoplsmica.

Existen tres tipos principales de pili (pilus, en singular):

fimbrias adhesivas
pelos sexuales
otros

Fimbrias adhesivas

Son pelos de 4 a 7 nm de dimetro (segn especies),

repartidas por toda la superficie y que funcionan como
adhesinas, es decir como estructuras para la adhesin a
sustratos vivos o inertes. Condicionan varias propiedades
biolgicas, derivadas de sus propiedades adhesivas:

microcolonias y velos (los velos son pelculas formadas por

acmulos de bacterias en medios estticos -en reposo-).
adhesin a superficies inertes
adhesin superficies vivas. En el caso de bacterias patgenas, esta
capacidad tiene que ver con su virulencia, invasividad del
tejido.

Ejemplos de funcin como adhesinas:

en la formacin de la placa dental, por coagregacin de individuos

 de distintas especies sobre el diente;
factores de colonizacin de tejidos, por ejemplo en el gonococo
(Neisseria gonorrhoeae) y en las cepas uropatognicas de
Escherichia coli.

La funcin de adhesina no reside en la pilina que constituye la

inmensa mayora de la fimbria, sino en una protena especial
de la punta del pelo. La mayora de estas protenas de la
punta pertenecen a la clase de las llamadas lectinas, es decir,
protenas o glucoprotenas capaces de unirse con gran
afinidad a cadenas laterales de polisacridos presentes en la
membrana citoplsmica de las clulas del hospedador a las
que se adhieren.

Aspectos genticos: Los genes codificadores de las protenas

de los pelos adhesivos son de localizacin cromosmica. En
muchas bacterias patgenas se da un fenmeno de variacin
de fase: se trata de cambios rpidos y reversibles por los que
clulas piliadas (Fim+) pueden convertirse en no piliadas
(Fim--), y viceversa. El significado adaptativo es que los
individuos Fim+ son los ms capaces de iniciar la colonizacin
del animal hospedador, pero son ms sensibles a la
fagocitosis, mientras que una vez que han colonizado el
epitelio, el cambio a Fim-- permite que los individuos resistan
mejor la fagocitosis.

Pero adems, existe otro interesante mecanismo adaptativo:

las clulas Fim+ de algunas especies experimentan fenmenos
de variacin antignica, es decir, por una serie de
mecanismos genticos, cambian la especificidad antignica de
su pilina, lo que supone una estrategia de evitacin contra el
sistema inmune del hospedador (un caso ms de esa "carrera
de armamentos" evolutiva que se libra entre microorganismos
y organismos superiores).

Algunas pilinas (por ejemplo, en los gneros Moraxella y

Neisseria) sirven tambin como parte del aparato necesario
para la transformacin gentica por ADN exgeno.

Pelos sexuales de enterobacterias y otras bacterias Gram-negativas

Son ms largos y ms gruesos (unos 10 nm de dimetro) que

las fimbrias adhesivas. Aparecen en menor nmero (de 1 a 10
por clula), y su funcin es la de permitir los contactos
iniciales en la conjugacin, como rgano de reconocimiento
entre la bacteria donadora, dotada del pelo sexual, y la
receptora, carente de l.
Sus genes son de localizacin plasmdica.

Hay dos clases principales de pelos sexuales: los de de tipo F

y los de tipo I, cada uno con un tipo de protena distinta
(genricamente conocida como pilina sexual). Son usados
como receptores especficos por parte de algunos fagos.

Hablaremos de los pelos sexuales cuando abordemos el

captulo de Conjugacin bacteriana.